Akademik Veri Yönetim Sistemi
16. Ulusal Histoloji ve Embriyoloji Kongresi, Sakarya, Türkiye, 26 - 28 Eylül 2024, ss.183-184, (Özet Bildiri)
İNSAN G.BEK KORDONU MULTIPOTENT STROMA H.CRELERI
KAYNAKLI EKZOZOMLARIN İN-VITRO HIPOKSIK VE NORMOKSIK
KOŞULLARDA ENDOTEL H.CRELERI .ZERINDE ANJIYOGENEZ
ETKINLIĞININ SINANMASI VE KARŞILAŞTIRILMASI
BİLGE SERDAROĞLU1 | İBRAHİM ALPTEKİN1 | EZEL ERKAN1 |
MOHAMMADREZA DASTOURI2 | ŞERİFE ESRA .ETİNKAYA3 | MESUT AKYOL4 |
ALP CAN1 | FERDA TOPAL .ELİKKAN1
1 Ankara Üniversitesi Tıp Fakültesi Histoloji Ve Embriyoloji Anabilim Dalı Üreme Ve Kök Hücre Laboratuvarı,
Altındağ, | 2 Ankara Medipol Üniversitesi Tıp Fakültesi, Tıbbi Biyoloji Anabilim Dalı, Altındağ, Ankara |
3Ankara Üniversitesi Tıp Fakültesi Kadın Hastalıkları Ve Doğum Anabilim Dalı, Mamak, Ankara | 4 Ankara
Yıldırım Beyazıt Üniversitesi Tıp Fakültesi, Biyoistatistik Ve Tıbbi Bilişim Anabilim Dalı, Etlik, Ankara
bilgeserdaroglu7@gmail.com
.zet
Giriş: MSH'ler (Multipotent stroma hücreleri), insan g.bek kordonu (iGK) dahil olmak üzere
bir.ok dokudan izole edilirler. MSH'ler etkilerini sadece doğrudan hücre-hücre etkileşimleri
yoluyla değil, aynı zamanda ekzozomlar aracılığıyla parakrin olarak da g.sterir. Ekzozomlar,
30-200 nm .apında lipid .ift zarla .evrili, i.eriğinde proteinler, lipitler, metabolitler ve
nükleik asitler gibi biyomoleküller bulunan hücre dışı veziküllerdir. Ekzozomların i.eriği,
elde edildikleri hücre tipi ve dış .evre koşullarına g.re değişebilir ve dolayısıyla bu i.erik
düzenlenebilir. Anjiyogenez, mevcut damarlardan yeni damarların oluştuğu süre.tir. MSH'den
elde edilen ekzozomların in-vitro ve in-vivo anjiyogenik kapasiteyi artırdığı g.sterilmiştir.
Ayrıca, normoksik ve hipoksik .n koşullandırmaya tabi tutulan MSH’den elde edilen
ekzozomların farklı anjiyojenik kapasiteyi artırma düzeyleri olduğuna dair .alışmalar
bulunmaktadır.
Ama.: Normoksi (%21 O2) ve hipoksi (%1 O2) koşullarındaki iGK-MSH’den elde edilen
ekzozomların 50 μg/mL ve 200 μg/mL konsantrasyonlarda insan umbilikal ven endotel
hücreleri (HUVEC) üzerinde in-vitro tüp formasyonu oluşturma etkinliğini karşılaştırmayı
ama.lıyoruz.
Materyal-Metod: Eksplant kültür ile elde edilen pasaj4-5 iGK-MSH, 48 saat boyunca %10
ekzozom i.ermeyen fetal sığır serumu i.eren kültür ortamı ile normoksi ve hipoksi
koşullarında inkübe edildi ve sonrasında toplanan kültür ortamından diferansiyel
ultrasantrifüjle ekzozomlar ayrıştırıldı ve taramalı elektron mikroskobu, Western blot,
MicroBCA, ayarlanabilir diren.li darbe algılama sistemiyle karakterize edildi. HUVEC,
Matrigel. ile kaplı ortama ekilerek 50 μg/mL ve 200 μg/mL konsantrasyonlarda ekzozom
i.eren endotel bazal medium (EBM) ile kültüre edildi. Negatif kontrol olarak EBM, pozitif
kontrol olarak ekzozom i.ermeyen, büyüme fakt.rleri i.eren EBM kullanıldı. 12. saatte
g.rüntülenen anjiyogenez deneylerinde, ImageJ Angiogenesis Analyzer eklentisiyle
anjiyogenik kapasiteyi g.steren toplam uzunluk, düğüm sayısı, ağ sayısı ve ağ alanı değerleri
.l.üldü. Veriler SPSS 22.0 ile analiz edildi. p<0.05 istatistiksel olarak anlamlı kabul edildi.
Bulgular: iGK-MSH’den, normokside 21,21μg/10⁶hücre, hipokside 11,65μg/10⁶hücre
ekzozom proteini elde edildi. .l.ülen parametrelerde normoksik ve hipoksik grupların kendi
i.inde iki ekzozom konsantrasyonu arasında anjiyogenik kapasitesiteyi g.steren değişkenler
a.ısından istatistiksel olarak anlamlı fark belirlenmedi. Hipoksi grubundaki 50 μg/mL
konsantrasyonunun anjiyogenik kapasitesinin, normoksi gruplarından düşük olduğu bulundu.
Sonu.: iGK-MSH’ın, normoksi koşullarında hipoksi koşullarına g.re daha fazla miktarda
ekzozom ürettiği ve normoksi koşullarında elde edilen ekzozomların, hipoksi koşullarında
elde edilen ekzozomlara g.re anjiyogenezi arttırdığı sonu.ları ortaya .ıktı. Ayrıca
ekzozomların O2 düzeyinden bağımsız olarak 50-200 μg/mL konsantrasyonlarının tüp
oluşturma etkinlikleri benzer bulundu. %1 O2 düzeyindeki hipoksinin, ekzozomların
i.eriğinde bulunan anjiyogenezi başlatıcı ve devam ettirici fakt.rlerin miktarını olumsuz
y.nde etkilemiş olabileceği; doz artırımının bu olumsuz etkiyi azaltıcı y.nde bir etki yaptığı
düşünülebilir. Bu sonucu aydınlatmak amacıyla daha büyük bir .rneklemle farklı ekzozom
konsantrasyonu ve O2 düzeyleriyle ger.ekleştirilen hipoksi deneyleri planlanabilir.