Akademik Veri Yönetim Sistemi
Tezin Türü: Doktora
Tezin Yürütüldüğü Kurum: Ankara Üniversitesi, Sağlık Bilimleri Enstitüsü, Türkiye
Tezin Onay Tarihi: 2012
Tezin Dili: Türkçe
Öğrenci: MEŞKULE ŞAHİN
Danışman: Berna Aslan
Özet:Bu çalışmanın amacı, kök kanal tedavilerinde kullanılan AH Plus, Tubli Seal EWT, EndoREZ, MTA Fillapex, Real Seal kök kanal dolgu patlarının L-929 hücre kültüründe MTT testi ile sitotoksik etkilerinin ve ayrıca Enterococcus faecalis üzerinde direkt temas testi ile antimikrobiyal etkilerinin incelenmesidir. Çalışmanın birinci bölümünde, 6 kuyucuklu plağın her bir kuyucuğuna farklı kök kanal dolgu patı 1 cm alanı kaplayacak şekilde yerleştirilmiştir. Örnekler üzerine DMEM ilave edilerek, 24, 48 ve 72 saat bekletilmiştir. Elde edilen ekstraksiyon sıvıları, L-929 hücre süspansiyonu içeren 96 kuyucuklu plakların her bir gözüne 100 l yerleştirilmiştir. 48 saatlik inkübasyondan sonra plaklardan ekstraksiyon sıvıları uzaklaştırılmış ve her bir göze 25 l MTT solüsyonu ilave edilerek 4 saat süre ile bekletilmiştir. Bu sürenin sonunda spektrofotometrede 570 nm'de absorbansları ölçülmüştür. Çalışmanın ikinci bölümünde, kök kanal dolgu patları karıştırılarak 96 kuyucuklu plakların yan duvarına yerleştirilmiş ve 10 ?l bakteriyel süspansiyon eklenerek, bakteri ve patın direkt temasını sağlamak için 1 saat beklenmiştir. Patın bulunduğu kuyucuklara taze besiyeri eklenmiş ve bu kuyucuklardan 15 ?l besiyeri alınarak sadece besiyeri bulunan kuyucuklara ilave edilmiştir. Bakteriyel büyüme, 18 saatlik zaman periyodunda ilk 6 saat ve son 6 saat her saatte bir spektrofotometre kullanılarak 620 nm'de ölçülmüştür. Mosmann'ın sınıflamasına göre AH Plus her 3 zaman diliminde de sitotoksisite göstermezken, Tubli Seal EWT, EndoREZ, MTA Fillapex ve Real Seal 24. ve 48. saatlerde orta, 72. saatte ise hafif derecede sitotoksisite göstermişlerdir. MTT testi sonuçlarına göre ise, 24, 48 ve 72 saatlik değerlendirmede hücre canlılık oranları bakımından AH Plus ve kontrol grubu arasında istatistiksel olarak anlamlı bir fark gözlenmezken (p>0,05), diğer kök kanal dolgu patları ve kontrol grubu arasında istatistiksel olarak anlamlı bir fark olduğu tespit edilmiştir (p<0,05). Kontrol grubuna ait hücre canlılık oranları Tubli Seal EWT, EndoREZ, MTA Fillapex ve Real Seal kök kanal dolgu patlarının hücre canlılık oranlarından anlamlı derecede daha yüksektir. Direkt temas testi sonuçlarına göre, Grup A (pat var)'da ilk 6 saatlik sürede Real Seal hariç diğer tüm kök kanal dolgu patları antimikrobiyal etki gösterirken, son 6 saatlik sürede EndoREZ, MTA Fillapex ve Real Seal antimikrobiyal etkilerini devam ettirmişlerdir. Tubli Seal EWT 14. saatte antimikrobiyal etkisini kaybetmeye başlamış, Real Seal antimikrobiyal etkinlik göstermemiştir. Grup B (pat yok)'de ilk 6 saatlik sürede bütün kök kanal dolgu patları antimikrobiyal etki gösterirken, son 6 saat tüm patlar antimikrobiyal etkilerini kaybetmişlerdir. Abstract The aim of this study was evaluate the cytotoxicity of root canal sealers AH Plus, Tubli Seal EWT, EndoREZ, MTA Fillapex and Real Seal on L-929 cells with the MTT assay and the antimicrobial effects on Enterococcus faecalis using the direct contact test. In the first part of this study, sealers were placed in six-well plate. Every sealers placed at the bottom of each well to cover an area of 1 cm diameter. Placed DMEM on samples for 24, 48 and 72 hours. 100 ?l of eluate was transferred to a 96- well plate containing L-929 cell suspension. After 48 hours incubation the extracts were removed from the wells, 25 ?l MTT solution was added to each well and waited for 4 hours. Subsequently, the spectrophotometric absorbance was measured at 570 nm using a spectrophotometer. In the second part of this study, sealers were mixed and placed on the side walls of 96-well plate well and 10 ?l bacterial suspensions were allowed to directly contact with the sealers for 1 hour. Fresh media were added to wells which including sealers and 15 ?l were transferred from this wells to another wells containing fresh medium. Bacterial growth was then measured using spectrophotometer at 620 nm first six and last six hours at one hour periods over 18 hours. According to Mosmann?s scala AH Plus was non-cytotoxic, Tubli Seal EWT, EndoREZ, MTA Fillapex and Real Seal had moderate cytotoxicity at 24 and 48 hour evaluation and slightly cytotoxicity at 72 hour evaluation. According to the MTT assay, in the rates of cell viability there was no statistically significant difference between AH Plus and control group at 24, 48 and 72-hour evaluation (p>0.05), but there was statistically significant difference between the other sealers and control group (p<0.05). The control group had significantly high rates of cell viability than Tubli Seal EWT, EndoREZ, MTA Fillapex and Real Seal. The results of the direct contact test showed that, in Grup A (paste present) at first six hours except Real Seal all sealers had antimicrobial effect, at last six hours AH Plus, EndoREZ and MTA Fillapex continue their antimicrobial effect, Tubli Seal EWT started to loose its antimicrobial effect at 14. hour and Real Seal had no antimicrobial effect. In Grup B (paste absense) at first six hours all sealers had antimicrobial effect, but they lost their antimicrobial effect at last six hours.