Lactococcus garvieae ile enfekte edilen tilapia balıklarında (Oreochromis niloticus L.) plazma lizozim aktivitesinin belirlenmesi


Tezin Türü: Yüksek Lisans

Tezin Yürütüldüğü Kurum: Ankara Üniversitesi, Fen Bilimleri Enstitüsü, Türkiye

Tezin Onay Tarihi: 2007

Tezin Dili: Türkçe

Öğrenci: FAİK SERTEL SEÇER

Danışman: HİJRAN YAVUZCAN

Özet:

Bu çalışmada Tilapia balıklarında (Oreochromis niloticus L.) Gram pozitif bir bakteri olan Lactococcus garvieae`nınsublethal dozda non-spesifik bağışık yanıtın önemli parametrelerinden plazma lizozim aktivitesi ve hematokrit değereetkisi değerlendirilmiştir. Bu parametreler; i) L.garvieae ile intraperitonal enjeksiyonla sublethal dozda deneyselolarak enfekte edilen balıklarda (Grup L); ii) deneysel olarak enfekte edilen balıklarla birlikte kohabitasyona bırakılanbalıklarda (Grup LK); iii) PBS verilen kontrol grubu balıklarında (Grup P) ve iv) herhangi bir işleme tabi tutulmayankontrol grubu balıklarda (Grup PK) ölçülmüştür. Deneysel enfeksiyon L.garvieae`nın intraperitonal enjeksiyonu ilegerçekleştirilmiştir. L.garvieae'nın tilapia balıklarındaki LC50 değeri Kärber metoduna göre 1x1010kob/ml olaraksaptanmıştır. Sublethal doz 1x109kob/ml intraperitonal (i.p) olarak uygulanmıştır. Kontrol grubuna aynı miktarda PBSi.p olarak verilmiştir. Örnekleme, enjeksiyonu takiben 3., 5. ve 7. günlerde yapılmıştır. Plazma lizozim aktivitesi GrupL balıklarında günlere bağlı olarak değişim göstermiştir (P<0,05); 3. günde 11,5 ± 3,03 U/ml; 5. günde 19,3 ± 3,83U/ml; 7. günde 6,1 ± 0,949 U/ml olarak ölçülmüştür. Plazma lizozim aktivitesi Grup LK balıklarında günlere bağlıolarak değişim göstermiştir (P<0,05); 3. günde 17,4 ± 2,83 U/ml; 5. günde 7,4 ± 1,54 U/ml; 7. günde 8,1 ± 2,67 U/mlolarak ölçülmüştür. Plazma lizozim aktivitesi Grup P balıklarında günlere bağlı olarak değişim göstermiştir (P<0,05);3. günde 14,6 ± 4,86 U/ml; 5. günde 21,0 ± 9,30 U/ml; 7. günde 9,8 ± 1,53 U/ml olarak ölçülmüştür. Plazma lizozimaktivitesi Grup PK balıklarında günlere bağlı olarak değişim göstermiştir (P<0,05); 3. günde 9,2 ± 1,32 U/ml; 5. günde5,8 ± 1,86 U/ml; 7. günde 7,6 ± 1,29 U/ml olarak ölçülmüştür. Hematokrit değeri Grup L balıklarında günlere bağlıolarak değişim göstermiştir (P<0,001); 3. günde % 21,20 ± 0,50; 5. günde % 18,24 ± 0,80; 7. günde % 10,59 ± 0,83olarak ölçülmüştür. Hematokrit değeri Grup LK balıklarında günlere bağlı olarak değişim göstermiştir (P<0,001); 3.günde % 22,64 ± 0,46; 5. günde % 18,88 ± 0,53; 7. günde % 12,14 ± 0,66 olarak ölçülmüştür. Hematokrit değeri GrupP ve Grup PK balıklarında günlere bağlı olarak değişim göstermiştir (P<0,001); Grup P balıklarında 3. günde % 22,42± 0,50; 5. günde % 13,84 ±0,45; 7. günde % 11,54 ± 0,49 olarak ölçülmüştür. Hematokrit değeri Grup PK balıklarında3. günde % 22,13 ± 0,68; 5. günde % 19,92 ± 0,52; 7. günde % 14,37 ± 0,45 olarak ölçülmüştür. Tilapia balıklarındaL.garvieae'nın horizontal bulaşma potansiyeli bulunmaktadır. Ancak plazma lizozim aktivitesi, L.garvieae ile enfektetilapia balıklarında sabit bir değişim göstermemiştir. abstractIn this study the plasma lysozyme activity, as an indicator of non-spesific immune response, and hematocrit value wereevaluated in tilapia (Oreochromis niloticus L.) experimentally infected with Gram positive bacterium Lactococcusgarvieae at a sublethal dose. Plasma lysozyme activity and hematocrit value were measured in fish; i) experimentallyinfected fish via intraperitonally injection of L.garvieae at a sublethal dose (Group L); ii) cohabitated fish withexperimentally infected fish (Group LK); iii) control fish injected with PBS (Group P) and iv) control fish without anyapplication (Group PK). Experimental infection were carried out by intraperitonally injection of L.garvieae. LC50value of L.garvieae assessed acccording to Kärber is 1x1010cfu/ml. For the experimental infection sublethal dose of1x109cfu/ml was injected by intraperitonally. PBS was given to the control group at the same volume. Sampling wasmade at 3rd, 5th and 7th days after challenge. Plasma lysozyme activity in Group L change during the experiment days(P<0.05). Plasma lysozyme activity values in Group L was measured as 11.5 ± 3.03 U/ml in the 3rd day; 19.3 ± 3.83U/ml in the 5th day and 6.1 ± 0.95 U/ml in the 7th day. Plasma lysozyme activity in Group LK was decreased duringthe sampling days (P<0.05). Plasma lysozyme activity values in Group LK was measured as 17.4 ± 2.83 U/ml in the3rd day; 7.4 ± 1.54 U/ml in the 5th and 8.1 ± 2.67 U/ml in the 7th day. Plasma lysozyme activity in Group P wasdecreased during the experiment days (P<0.05). Plasma lysozyme activity values in Group P was measured as 14.6 ±4.86 U/ml in the 3rd day; 21.0 ± 9.30 U/ml in the 5th and 9.8 ± 1.53 U/ml in the 7th day. Plasma lysozyme activity inGroup PK increased depending on sampling days (P<0.05). Plasma lysozyme activity values in Group PK wasmeasured as 9.2 ± 1.32 U/ml in the 3rd day; 5.8 ± 1.86 U/ml in the 5th and 7.6 ± 1.29U/ml in the 7th day. Hematocritvalues in Group L was decreased during the sampling days days (P<0.001). Hematocrit values in Group L wasmeasured as 21.20 ± 0.50% in the 3rd; 18.24 ± 0.80% in the 5th and 10.59 ± 0.83% in the 7th day. Hematocrit values inGroup LK was decreased during the experiment days (P<0.001). Hematocrit values in Group LK was measured as22.64 ± 0.46% in the 3rd; in the 5th 18.88 ± 0.53% and 12.14 ± 0.66% in the 7th day. Hematocrit values in Group P andGroup PK were decreased depending on sampling days (P<0.001). Hematocrit values in Group P was measured as22.42 ± 0.50% in the 3rd; 13.84 ± 0.45% in the 5th and 11.54 ± 0.49% in the 7th day. Hematocrit values in Group PKwas measured as 22.13 ± 0.68% in the 3rd; 19.92 ± 0.52% in the 5th and 14.37 ± 0.45% in the 7th day. There is apotential of horizontal infection risk in tilapia infected with L.garvieae. However a constant change in the plasmalysozyme activity has not been detected in tilapia fish that infected with L.garvieae.