Türkiye'nin değişik bölgelerinden termostabil alfa amilaz üreten Bacillus sp. türlerinin izolasyonu karakterizasyonu ve alfa amilaz geninin klonlanması

---

Tezin Türü: Yüksek Lisans

Tezin Yürütüldüğü Kurum: Ankara Üniversitesi, Biyoteknoloji Enstitüsü, Biyoteknoloji Anabilim Dalı, Türkiye

Tezin Onay Tarihi: 2006

Tezin Dili: Türkçe

Öğrenci: TUĞBA ŞİMŞEK

Danışman: ÖZLEM OSMANAĞAOĞLU

Açık Arşiv Koleksiyonu: AVESİS Açık Erişim Koleksiyonu

Özet:

Bu çalışma kapsamında Türkiye'nin değişik bölgelerindeki doğal sıcak sukaynaklarından (kaplıca kaynaklarından) su örnekleri toplanmış ve bu örneklerdenthermostabil ?-amilaz üreten termofilik Bacillus'lar (optimum üreme sıcaklığı >50°C olan termofilik Bacillus türleri) izole edilmiştir ve Bacillus sp. OZ1 suşunda?-amilaz enzim aktivitesi DNS yöntemi ile belirlenmiştir. Bununla beraber, ?-amilaz enzim üretiminden sorumlu olan ?Amy E? geni uygun primerlerinkullanımı ile uygun koşullar altında Polimeraz Zincir Reaksiyonu ile (PCR)çoğaltılarak pBR322 pilazmid vektörüne takılarak uygun konukçu hücre olan veCaCl2 ile alıcı hale getirilen E. coli DH? suşuna aktarılmış ve genin konukçuhücrede ifadesi gözlemlenmiştir. Rekombinant pilazmidi taşıyan kolonilerinenzim aktivitesi belirlenerek mature enzim aktivitesi ile kıyaslanmıştır.Anahtar Kelimeler: Amy E, ?-amilaz, gen klonlanması, PCR, Termofil Bacillussp., termostabil enzim