KANATLI HAYVANLARDA AŞI POTANSİYELİ OLAN SALMONELLA ENTERITIDIS AroA VE CLPP MUTANTLARININ GELİŞTİRİLMESİ
Tezin Türü: Doktora
Tezin Yürütüldüğü Kurum: Ankara Üniversitesi, Sağlık Bilimleri Enstitüsü, MİKROBİYOLOJİ ANABİLİM DALI, Türkiye
Tezin Onay Tarihi: 2022
Tezin Dili: Türkçe
Öğrenci: TAJELSER IDRIS BADRI ADAM TAJELSER IDRIS BADRI ADAM
Danışman: Barış Sareyyüpoğlu
Açık Arşiv Koleksiyonu: AVESİS Açık Erişim Koleksiyonu
Özet:Kanatlı Hayvanlarda Aşı Potansiyeli Olan Salmonella Enteritidis AroA ve ClpP Mutantlarının Geliştirilmesi Bu çalışmada, virülans antijenlerini kodlayan aroA ve ClpP genlerinde delezyon yaparak kanatlı hayvanlarda aday aşı potansiyeli Salmonella Enteritidis mutantlarının geliştirmesi ve in vitro koşullarda özelliklerini karşılaştırması amaçlandı. SEI-△ClpP:CmR ve SEI-△aroA:CmR mutant suşları lambda red rekombinasyonu yöntemi kullanılarak, Ankara Üniversitesi Veteriner Fakültesi Mikrobiyoloji Anabilim Dalında, kanatlı kümeslerinin altlık örneklerinden izole edilen ve Pulsed Field Jel Elektroforezi ile genotiplendirilmiş olan Salmonella Enteritidis saha suşundan oluşturuldu. Elde edilen mutant suşlarının özellikleri saha suşyla karşılaştırıldığında, SEI-△aroA:CmR'nin 37 oC ve 42oC'de 4,5 pH'lı LB besiyerinde yavaş ürediği ve SEI-△ClpP:CmR mutant suşunun %5 NaCl'lı LB besiyerinde yüksek duyarlılık gösterdiği saptandı. SEI-△ aroA:CmR mutant suşu, XLD agarda ve biyokimyasal testlerde H2S negatif bir sonuç verdi. Oda sıcaklığında ve 42oC'de SEI- △aroA:CmR ve SEI-△ClpP:CmR mutant suşlarının motiliteleri azaldı, ve antibiyotiklere karşı duyarlılıkları arttı. SEI-△aroA:CmR mutantının yumurta sarısına ve EDTA'ya duyarlılığı sırasıyla 16 kat ve 4 kat arttı, domuz serumuna karşı çok yüksek duyarlılık gösterdi, SEI-△ClpP:CmR mutant suşunun yumurta sarısına karşı duyarlılığı 8 kat arttı. Vero hücre kültüründe mutantların adezyonu ve invazyonu, SEI- △aroA:CmR mutantının sırasıyle 33 kat ve 18 kat, SEI-△ClpP:CmR mutant suşu ise sırasıyla 3 kat ve 4 kat azaldı. PFGE genotiplendirmesinde, SEI-△aroA:CmR ve SEI- △ClpP:CmR mutant suşlarının PFGE paternleri, saha suşunun PFGE paterninden farklılık gösterdi. Elde edilen sonuçlara göre, geliştirilen mutant suşlarının in vitro koşullarda net bir attenüasyon gösterdiklerinden, tavukları Salmonella Enteritidis enfeksiyonundan korumak için adayı aşı suşlar olarak kullanılmasında faydalı olacağı düşünülmektedir. Anahtar Sözcükler: Salmonella Enteritidis, aroA, ClpP, Mutant, Aşı.