Acı kavun (Ecballium elaterium (L.) A. Rich.) meyve özsuyunun ketende (Linum usitatissimum L.) sürgün rejenerasyonu ve Agrobacterium tumefaciens aracılığıyla gen aktarımı üzerine etkisi


Tezin Türü: Yüksek Lisans

Tezin Yürütüldüğü Kurum: Ankara Üniversitesi, Fen Bilimleri Enstitüsü, TARLA BİTKİLERİ ANABİLİM DALI, Türkiye

Tezin Onay Tarihi: 2014

Tezin Dili: Türkçe

Öğrenci: MURAT AYCAN

Danışman: MUSTAFA YILDIZ

Açık Arşiv Koleksiyonu: AVESİS Açık Erişim Koleksiyonu

Özet:

Bu çalışma, acı kavun (Ecballium elaterium (L.) A. Rich.) meyve özsuyunun ketende (Linum usitatissimum L.) sürgün rejenerasyonu ve Agrobacterium tumefaciens aracılığıyla gen aktarımı üzerine etkilerini belirlemek amacıyla yürütülmüştür. A.B.D.'nin Kuzey Dakota eyaletinde bulunan "Northern Crop Science Laboratories"den temin edilen 'Madaras' keten (Linum usitatissimum L.) çeşidi kullanılmıştır. Hipokotil eksplantlarının rejenerasyonu üzerinde etkisini araştırmak amacıyla farklı acı kavun meyve özsuyu dozları (0-kontrol, 200, 400, 800 ve 1600 µl/L) otoklavdan sonra bitki büyüme ortamına eklenmiştir. En yüksek sürgün rejenerasyonu, 400 µl/L acı kavun meyve özsuyu uygulamasından alınmıştır. Gen aktarımı çalışmalarında, kanamisine dayanıklılığı belirleyen npt II ve raportör GUS genlerini bulunduran 'pBin 19' plazmidini içeren Agrobacterium tumefaciens'in GV2260 hattı kullanılmıştır. Bakteri büyütme ve inokülasyon ortamlarına farklı dozlarda (0-kontrol, 200, 400, 800 ve 1600 µl/L) acı kavun meyve özsuyu eklenirken, seleksiyon ortamına 400 µl/L meyve özsuyu konulmuştur. Aday transgenik bitkiler üzerinde yapılan moleküler analizler, bakteri büyütme ve inokülasyon ortamına katılan 400 µl/L acı kavun meyve özsuyunun gen aktarım frekansını önemli derecede artırdığını göstermiştir.