Agresiv B hücreli lenfomaların ayırıcı tanısında farklı şekillerde parafin bloklardan elde edilen materyallerde interfaz kromojenik insitu hibridizasyon (CISH) yönteminin C-myc translokasyonu belirlemede güvenilirliği ve tanısal değeri
Tezin Türü: Tıpta Uzmanlık
Tezin Yürütüldüğü Kurum: Ankara Üniversitesi, Tıp Fakültesi, PATOLOJİ ANABİLİM DALI, Türkiye
Tezin Onay Tarihi: 2005
Tezin Dili: Türkçe
Öğrenci: EBRU EROL
Danışman: IŞINSU KUZU
Özet:ÖZET Agresiv B Hücreli Lenfomaların Ayırıcı Tanısında Farklı Şekillerde Parafin Bloklardan Elde Edilen Materyallerde İnterfaz Kromojenik İn-Situ Hibridizasyon (CISH) Yönteminin C-Myc Translokasyonu Belirlemede Güvenilirliği Ve Tanısal Değeri Giriş: Burkitt lenfomagenezisinde C-myc translokasyonlan major genetik anormalidir. C-myc translokasyonlarını tespit etmede konvansiyonel sitogenetik metodların uygulanması rutin kullanımda güç olabilir. Bu nedenle daha önceki bazı çalışmalarda parafin doku kesitlerine interfaz floresan in-situ hibridizasyon (FISH) uygulanması önerilmektedir. Ancak bu yöntem floresan mikrokobu ve değerlendirme için özel eğitim gerektirmektedir. Ayrıca karanlık alanda inceleme yapılması morfolojik bulguları değerlendirmede güçlük yaratabilir. Bu çalışmada bizim amacımız lenfoma vakalarında parafin doku kesitlerinde c-myc translokasyonlarını tespit etmede interfaz kromojenik in-situ hibridizasyon yönteminin etkinliğini belirlemekti. Materyal-Method: Burkitt veya diğer tiplerde agresif lenfoma tanısı almış 44 B hücreli lenfoma vakası çalışılmıştır. Parafin bloklardan hazırlanan doku array bloklarının parafin kesitlerine ve ayrıca yine parafin bloklardan elde edilen hücre süspansiyonlarına CISH yöntemi uygulanmıştır. C-myc geninde görülen tüm translokasyonlan içeren digoksigenin işaretli c-myc-c ve biotin işaretli c-myc-t DNA problan (Zymed, CA, USA) kullanılmıştır. Işık mikroskopik görüntüleme için DAB ve Fast Red kromoj enleri ile inkübasyonu içeren CISH detection kit (Zymed, CA, USA) uygulanmıştır. Her vaka için 2 çift sinyal içeren yaklaşık 200 hücre sayılmıştır. Bulgular: Translokasyon içeren hastaların median yaşı 24 (3-60) iken translokasyon içermeyen hastaların median yaşı 59 (47-76) bulunmuştur. BL ve varyantları grubunda translokasyon yüzdesinin %11 ile %92.5 arasında değişkenlik gösterdiği 60saptanmıştır (ortanca:%65.5). LBCL grubunda ise translokasyon yüzdesi %0 ile %75.9 arasında değişkenlik göstermektedir (ortanca: %4.9). Her iki grup arasındaki c-myc translokasyon yüzdelerinin ortalaması arasındaki fark istatiksel olarak anlamlı bulunmuştur. Histopatolojik olarak, immünfenotipleri ve yüksek Ki-67 oranlan gösteren Burkitt lenfoma vakalanmn pozitif c-myc translokasyon oranlan ile korelasyon gösterdiği tespit edilmiştir. Aynca c-myc translokasyonu pozitif olan LBCL'lerin de yüksek ki-67 oranına sahip olduklan tespit edilmiştir. Tartışma ve Sonuç: İki renkli sinyal içeren CISH parafine gömülü lenfoma dokulannda c-myc translokasyonunun tespiti için sensitif bir method olarak kullanılabilir. Doku tesbit ve takibine bağlı faktörler yöntemin başansmı etkileyebilir. LBCL grubu vakalarda proliferasyon indeksi yüksek olanlarda c-myc translokasyonunun saptanması olaym biyolojisiyle uyumlu olarak yorumlanabilir. Bu da yöntemin duyarlılığını destekleyen bulgulardandır. Örneklerin ışık mikroskobunda değerlendirilmesi, kromozomal anormalliklerin histolojik ve morfolojik değişikliklerle birlikte yorumlanabilmesi ve tekrar değerlendirmeye imkan veren uzun ömürlü slaydlar bu yöntemin avantajlarını oluşturmaktadır. Anahtar Sözcükler: C-myc translokasyonu, hücre süspansiyonu, kromojenik in-situ hibridizasyon, lenfoma, mikroarray 61