Anti-KIR ile aktive edilmiş NK-92 hücrelerinin meme kanseri hücreleri üzerindeki öldürücü etkisinin araştırılması

---

Tezin Türü: Doktora

Tezin Yürütüldüğü Kurum: Ankara Üniversitesi, Fen Bilimleri Enstitüsü, Biyoloji, Türkiye

Tezin Onay Tarihi: 2021

Tezin Dili: Türkçe

Öğrenci: NİL KILIÇ

Danışman: İrfan Kandemir

Açık Arşiv Koleksiyonu: AVESİS Açık Erişim Koleksiyonu

Özet:

Meme kanseri kadınlar arasında en sık görülen sağlık sorunudur. Her yıl binlerce kadını etkilemektedir. Meme kanseri tedavisinde kullanılan kemoterapi ve radyoterapi gibi geleneksel yöntemler komplikasyonlara neden olmaktadır. Bu durum yeni bir tedavi modeli arayışını zorunlu kılmaktadır. İmmün hücre alt grubu NK hücreleri sitotoksik özellikleri ile dikkat çekmektedir. Kanser hücreleriyle savaşmada çok etkilidirler. NK hücrelerinin en sitotoksik olanı NK-92'dir. Bu tezde, aktivatör reseptörü KIR2DL4 anti-KIR2DL4 mAb 33 ile sitotoksik NK-92 hücreleri uyarılarak NK-92 hücrelerinin aktivasyonu sağlanmıştır. Aktive edilmiş NK-92 hücreleri ile meme kanseri hücre hatlarına karşı sitotoksik etki artırılmaya çalışılmıştır. Ayrıca trastuzumab ve anti-KIR2DL4 mAb antikor kombinasyonunun HER2+ meme kanseri hücrelerine karşı öldürme etkinliği değerlendirilmiştir. İndüklenmiş ve indüklenmemiş NK-92 hücreleri, 1:1, 1:5 ve 1:10 hücre oranlarında meme kanseri MCF-7, SK-BR-3 ve normal meme MCF-12A ile birlikte kültürlendi. Antikor ve/veya trastuzumab ile birlikte kültürlenen hücreler, en etkili hücre oranını belirlemek için WST-1 ile sitotoksisite analizi yapılmıştır. Etkili hücre oranı belirlendikten sonra, apoptoz yolundaki Caspase 3, Caspase 9 ve Bax proteinlerinin sentezi immün boyama ve western blot ile analiz edilmiştir. Elde edilen sonuçlarda indüklenen NK-92 hücreleri MCF-12A normal meme hücreleri üzerinde herhangi bir etki göstermemektedir. Bununla birlikte, MCF-7 ve SK-BR-3, meme kanseri hücreleri üzerinde önemli sitotoksik etkiler göstermektedir. HER2+ SK-BR-3 için trastuzumab ve agonistik antikor kombinasyonu sonuçlarında hücre ölümü vardır. Fakat bu sonuçlar istatistiksel olarak anlamlı degildir. Agonistik antikor anti-KIR2DL4 mAb 33 ile indüklenen tüm NK-92 hücre gruplarında etkili olmasına rağmen, en etkili sonuç meme kanseri hücre hatlarına (MCF-7 ve SK-BR-3) karşı 1:10 oranında elde edilmiştir. (Hedef: Efektör). Elde edilen immün boyama ve western blot sonuçlarına göre, indüklenmiş NK-92 hücreleri ile birlikte kültürlenen gruplarda apoptoz yolundaki proteinler önemli ölçüde artmıştır. Elde edilen veriler yeni bir tedavi modeli sunabilme özelliğine sahiptir ve faz çalışmaları ile klinik çalışmalara yön veren temel bilgileri içermektedir.