Acı kavun (Ecballium elaterium (L.) a. rich.) meyve özsuyunun ayçiçeğinde (Helianthus annuus L.) adventif sürgün rejenerasyonu ve agrobacterium tumefaciens aracılığıyla gen aktarımı üzerine etkisi

SAMAH MAHGOUB HASSAN M SAAD

Acı kavun (Ecballium elaterium (L.) a. rich.) meyve özsuyunun ayçiçeğinde (Helianthus annuus L.) adventif sürgün rejenerasyonu ve agrobacterium tumefaciens aracılığıyla gen aktarımı üzerine etkisi

Tezin Türü: Doktora

Tezin Yürütüldüğü Kurum: Ankara Üniversitesi, Fen Bilimleri Enstitüsü, TARLA BİTKİLERİ ANABİLİM DALI, Türkiye

Tezin Onay Tarihi: 2017

Tezin Dili: Türkçe

Öğrenci: SAMAH MAHGOUB HASSAN M SAAD

Danışman: MUSTAFA YILDIZ

Açık Arşiv Koleksiyonu: AVESİS Açık Erişim Koleksiyonu

Özet:

Bu çalışma, acı kavun (Ecballium elaterium (L.) A. Rich.) meyve özsuyunun ayçiçeğinde (Helianthus annuus L.) adventif sürgün rejenerasyonu ve Agrobacterium tumefaciens aracılığıyla gen aktarım frekansının artırılması üzerine etkilerini belirlemek amacıyla yürütülmüştür. Bitki materyali olarak, '64A14', '64A71' ve 'Meriç' ayçiçeği (Helianthus annus L.) genotipleri kullanılmıştır. Sürgün rejenerasyonu ve gen aktarım frekansının artırılması için farklı hormon kombinasyonları ve acı kavun (Ecballium elaterium (L.) A. Rich.) meyve özsuyu kullanılmıştır. En yüksek sürgün rejenerasyon ortalaması kotiledon boğum eksplantından 64A71 çeşidinde (% 76) 1.00 mg / l BAP ve 1.00 mg / l NAA, (% 96) 1.00 mg / l BAP ve 1.00 mg / l NAA ile 400 ul/l acı kavun meyve özsuyu içeren MS ortamlarından elde edilmiştir. Besin ortamına acı kavun (Ecballium elaterium (L.) A. Rich.) meyve özsuyu ilavesi, sürgün rejenerasyon oranını, eksplant başına sürgün sayısını ve köklenmeyı olumlu şekilde etkilemiştir. Elde edilen sürgünler acı kavun meyve öz suyunun uygun dozlarını içeren MS ortamında köklendirilerek serada dış koşullarda alıştırılıp tohum elde edilmiştir. Çalışmanın ikinci aşamasında, p35S GUS-INT plazmidini taşıyan Agrobacterium tumefaciens'in GV2260 hattı kullanarak transgenik bitkiler seleksiyon ortamında seçilmiştir. Transgenik aday sürgünler 400 ve 800 ml/l acı kavun meyve özsuyu, 100mg/l kanamisin ve 500 mg/l Duocid içeren MS ortamda geliştirilmiştir. Transgenik aday sürgünler köklendirilmek için acı kavun özsuyu kullanılmıştır. Köklendirilen bitkiler serada dış şartlarda alıştırılıp tohum elde edilmiştir. PCR analizi ile transgenik bitkiler teyit edilmiştir.