Laktik asit bakterilerinin yara enfeksiyonlarında önemli patojenlere karşı potansiyel etkilerinin belirlenmesi
Tezin Türü: Yüksek Lisans
Tezin Yürütüldüğü Kurum: Ankara Üniversitesi, Fen Bilimleri Enstitüsü, BİYOLOJİ ANABİLİM DALI, Türkiye
Tezin Onay Tarihi: 2017
Tezin Dili: Türkçe
Öğrenci: TUĞÇE ÖNBAŞ
Danışman: FADİME KIRAN
Açık Arşiv Koleksiyonu: AVESİS Açık Erişim Koleksiyonu
Özet:Bu çalışmada Laktik Asit Bakterilerinin (LAB) potansiyel etkileri önemli deri parojenlerinden Pseudomonas aeruginosa PAO1/ATCC 27853, metisilin dirençli Staphylococcus aureus ATCC 43300 ve bu türlerin deri kronik yara örneklerinden izole edilen hastane kaynaklı suşlarına karşı değerlendirilmiştir. 40 LAB izolatı arasından sağlıklı anne sütüyle beslenen bebek fekal mikrobiyotasından izole edilen Lactobacillus plantarum F-10 izolatı sergilediği güçlü antimikrobiyal ve antibiyofilm etkisi dikkate alınarak seçilmiştir. İzolatın canlı hücreleri ve hücre bağımsız ekstraktı (HBE) tüm patojenlerin gelişimini inhibe ederken, nötralize HBE'de bu etki gözlemlenmemiştir. İzolat hemolize neden olmamış ve yüksek otoagregasyon (% 51±4.1, 5.saat) ve ko-agregasyon özelliği sergilemiştir. Antibiyotik dirençlilik profili Avrupa Gıda Güvenilirlik Otoritesine göre güvenilir bulunmuştur. İzolatın laktik asit (151±11.8 g/L) ile hücre dışına salınan (1157±102 mg/L) ve hücre yüzeyine bağlı (750±32 mg/L) EPS üretimi de belirlenmiştir. Biyofilm oluşumu kristal viyole analizi ile ölçülmüş ve Taramalı Elektron Mikroskobu ve Konfokal Lazer Taramalı Mikroskop ile görüntülenmiştir. Tüm patojenlerde biyofilm oluşumunda % 100 azalma HBE'nin sub-MİK değeri (12.5 mg/mL) ile 24 saat birlikte inkübasyon neticesinde elde edilmiştir. HBE'nin sub-MİK değerinin Pseudomonas aeruginosa ATCC 27853 suşunun yeter sayı algılama kontrollü virülans faktörleri (hareket, proteaz ve elastaz aktivitesi, piyosiyanin ve ramnolipid üretimi) üzerine inhibisyon etkiye sahip olduğu da gözlemlenmiştir. HBE'nin antioksidan aktivitesi (toplam antioksidan etki, fenolik ve flavonoid içerik) araştırıldığında ise, sub-MİK değerinin DPPH radikalini giderici etkisi % 88.6±3.5 olarak belirlenmiştir. HBE'nin HT-29 hücre hattı üzerindeki sitotoksik etkisi (% 98±2.5) MTT analizi ile belirlenmiştir (IC50:5.9 mg/mL). Sonuç olarak araştırma bulgularımız, güvenilir özellikler sergileyen Lactobacillus plantarum F-10 izolatının antimikrobiyal, antibiyofilm, antioksidan ve yeter sayı algılama kontrollü bazı virülans faktörleri engelleyici özellikleri ile yara iyileşmesi açısından terapötik potansiyele sahip olabileceğini ve topikal uygulamalarının özellikle enfekte yaralara karşı biyo-kontrol stratejisi olarak tasarlanabileceğini göstermektedir.