Pediococcus acidilactici PBF suşunda bakteriyosin üretiminden sorumlu genin aktarımı
Tezin Türü: Yüksek Lisans
Tezin Yürütüldüğü Kurum: Ankara Üniversitesi, Fen Bilimleri Enstitüsü, BİYOLOJİ ANABİLİM DALI, Türkiye
Tezin Onay Tarihi: 2009
Tezin Dili: Türkçe
Öğrenci: PELİN DOĞAN
Danışman: ÖZLEM OSMANAĞAOĞLU
Açık Arşiv Koleksiyonu: AVESİS Açık Erişim Koleksiyonu
Özet:Laktik asit bakterileri gıda endüstrisinde starter kültür olarak kullanılmaları, pilazmit tarafından kodlanan bakteriyosin üretim özelliklerinden dolayı gıdalarda raf ömrünü uzatmak için potansiyel biyolojik koruyucu rolüne sahip olmaları, probiyotik ürünlerin içeriğinde bulunmaları ile birlikte bazı LAB'lerinin gıdalarda bozulmaya sebep olmaları bu bakteri grubunu hem endüstriyel açıdan hem de bilimsel arenada üzerinde yoğun çalışmaların yapıldığı oldukça önemli bir grup haline getirmiştir.Çalışmamızda, gıda-kaynaklı Pediococcus acidilactici PBF suşunun birçoğu gıda bozulması ve gıda kaynaklı hastalıklar ile yakından ilişkili olan Pediococcus, Leuconostoc, Lactobacillus, Lactococcus, Staphylococcus, Enterococcus, Clostridium ve başta Listeria monocytogenes olmak üzere Listeria'nın birçok türüne karşı antimikrobiyal bir madde ürettiği gösterilmiştir. Proteolitik enzimlere duyarlı, ısıya ve organik çözücülere karşı dirençli ve geniş bir pH aralığında aktif olan bu antimikrobiyal madde çalışmanın ilerleyen aşamalarında ?anti-listerial bakteriyosin? olarak adlandırılmıştır. Agaroz jel elektroforezi ve pilazmit giderim (?curing?) çalışmaları Pediococcus acidilactici PBF suşunda bakteriyosin üretiminin 9.42kbp moleküler ağırlığına sahip bir pilazmit DNA (pPF1.0) tarafından kodlandığını göstermiştir. Bakteriyosine karşı konukçu bağışıklığının pPF1.0 pilazmiti ile ilişkili olduğu bulunmuştur. Pediococcus acidilactici PBF suşunda bakteriyosin üretiminden sorumlu pilazmit DNA (pPF1.0) kit kullanımı ile jel üzerinden elde edilerek saflaştırılmış ve bakteriyosin üretmeyen Pediococcus pentosaceus LAB (Bac-) suşuna elektroporasyon ile transforme edilmiştir. Elektrotransformasyon neticesinde artık bakteriyosin üretmeye/eksprese etmeye başlayan suş Pediococcus pentosaceus PG olarak isimlendirilmiştir.