Postmortem interval tayininde hücre dışı serbest DNA ve HMGB-1 'in rolü
Tezin Türü: Tıpta Uzmanlık
Tezin Yürütüldüğü Kurum: Ankara Üniversitesi, Tıp Fakültesi, Dahili Tıp Bilimleri Bölümü, Türkiye
Tezin Onay Tarihi: 2016
Tezin Dili: Türkçe
Öğrenci: EMRAH EMİRAL
Eş Danışman: İSMAİL HAMİT HANCI, NACİYE LALE TUFAN
Açık Arşiv Koleksiyonu: AVESİS Açık Erişim Koleksiyonu
Özet:Postmortem interval (PMI) tayini, adli ölümlerde ceza ve hukuk davalarında oldukça önemlidir. Hukuk davalarında ölüm zamanının tespiti özellikle mirasın bölüştürülmesinde gereklidir. Günümüzde pratik uygulamalarda kullanılan birçok yöntem subjektiftir. Kesin sonuç veren bir yöntem bulunmamaktadır. Moleküler çalışmaların adli bilimlerde kullanımının artmasıyla özellikle Adli Genetik alanında önemli çalışmalar yapılmıştır. Çalışmada, amacımız özellikle hücre nekrozuyla serumda artış gösteren hücre dışı serbest DNA ve serum HMGB-1 protein konsantrasyonlarının postmortem erken dönem değişikliklerinden yararlanarak PMI tayini yapabilmektir. Çalışma, ağırlıkları 230- 260 gr arasında değişen 96 adet wistar ratlar üzerinde gerçekleştirilmiştir. Ratlar, anestezi ve servikal dislokasyon sonrası +4°C ve +24°C olmak üzere iki farklı sıcaklıkta beklemeye bırakıldı. 0., 3., 6., 9., 12., 24., 48. ve 72. saatlerde otopsi ile kan örnekleri toplandı. 5000 rpm'de 5 dakika santrifüj edilerek serum ayrıldı. Serum örneklerinden HMGB-1 ELİSA kiti kullanılarak HMGB-1 konsantrasyon ölçümü ve SYBR Gold Nucleic Acid Gel Stain nükleik asit boyama protokolü sonrası hücre dışı serbest DNA miktarı için luminometre ile optik yoğunluk ölçüldü. Çalışmada elde edilen sonuçlar standart örneklerden elde edilen denklemler ile konsantrasyona çevrildi. +4°C'de serum hücre dışı serbest DNA miktarının postmortem süre uzadıkça arttığı saptandı (r =0.751 p<0.001). Serum HMGB-1 konsantrasyonunun postmortem zaman arttıkça yükseldiği bulundu (r =0.698 p<0.001). +24°C'de ise postmortem geçen sürenin, serum hücre dışı DNA miktarıyla negatif yönde ilişkili olduğu (r = -0.213 p=0.15), serum HMGB-1 konsantrasyonuyla ise pozitif yönde zayıf bir ilişkisi olduğu saptandı (r=0.313 p=0.030). Sonuç olarak; +4°C'de serum hücre dışı serbest DNA konsantrasyonu ve serum HMGB-1 konsantrasyonunun PMI tayininde kullanılabileği bulundu.