Farklı irrigasyon solüsyonlarının sitotoksisitelerinin hücre kültürü yöntemi ile karşılaştırılmalı olarak incelenmesi


Tezin Türü: Doktora

Tezin Yürütüldüğü Kurum: Ankara Üniversitesi, Sağlık Bilimleri Enstitüsü, Türkiye

Tezin Onay Tarihi: 2009

Tezin Dili: Türkçe

Öğrenci: ARZU BAYALAN ALDEMİR

Danışman: FATMA SEMRA SEVİMAY

Özet:

Farklı irrigasyon Solüsyonlarının Sitotoksisitelerinin Hücre Kültürü Yöntemi ile Karşılaştırılmalı Olarak incelenmesiBu çalışmanın amacı farklı irrigasyon solüsyonlarının sitotoksisitelerinin hücre kültürü yöntemi kullanılarak incelenmesi ve çıkan absorbans değerlerinin istatistiksel olarak karşılaştırılmasıdır. Çalışmamızda, 4 farklı irrigasyon solüsyonunun sitotoksik etkileri değerlendirilmiştir. Bu materyaller MTAD, SmearClear, EDTA, NaOCl‘dir. Her bir materyalden 12 adet örnek olacak şekilde 4mm iç çapında ve 4mm derinliğinde steril silindirik polietilen kaplara üretici firmaların talimatları doğrultusunda hazırlanarak aseptik şartlarda yerleştirilmiştir. Denenen her bir kimyasal için hazırlanan örnekler 24 kuyucuklu hücre kültürü plakalarının kuyucuklarına yerleştirilmiş ve üzerine1 ml (mililitre) kültür ortamı DMEM (Dulbecco's Modified Eagle Medium) ilave edilmiĢtir. Elde edilen örnekler 24. ve 48. saatlerde toplanmış, hücre canlılık testi için spektrofotometrik olarak ölçülmüştür. Sitotoksisitelerinin değerlendirilmesinde iki farklı yöntem kullanılmıştır. Birinci yöntem MTT yöntemi ile hücre canlılık testi, ikinci yöntem ise protein tayin yöntemi ile hücre canlılık testidir. Sonuçlarımız, MTT yöntemi ile absorbans değiĢimleri incelendiğinde, kontrol grubu ile deney grupları arasındaki farklılık istatistiksel olarak anlamlıbulunmuĢtur (p<0,001). Deney grupları ilk 24 saatte absorbans düzey dağılımı açısından değerlendirildiğinde, en az sitotoksik etkiyi MTAD, en yüksek sitotoksik etkiyi EDTA göstermiştir. Fakat, materyaller arasındaki absorbans düzey dağılım farklılığı istatistiksel olarak anlamlı değildir. 48. saatte ise en az toksisiteyi yine MTAD göstermiĢ, ancak 24. saatten farklıolarak en fazla toksik olan solüsyon NaOCl olarak bulunmuştur. 24. ve 48. saatler arasında sitotoksisite değiĢim düzeyi sadece SmearClear grubunda anlamlı şekilde artmıştır. Protein miktar tayini yönteminde ise kontrol grubuile MTAD, Smear Clear, NaOCl ve EDTA arasında her iki zaman dilimi için de farklılık istatistiksel olarak anlamlıdır (p<0.001). Grup içinde 24. ve 48. saatte deney grupları arasında sitotoksisite açısından en az toksik olan materyal MTAD iken, 24. saatte en fazla toksik olan materyal EDTA ve 48. saatte en fazla toksik materyal NaOCl olarak tespit edilmiştir (p<0,001). 24. ve 48. saatler arasında sitotoksisite değiĢim düzeyi SmearClear‘in yanı sıra NaOCl ve MTAD grubunda da anlamlı oranda artmıştır.Abstract The purpose of this study is to examine the cytotoxicities of different irrigation solutions through cellular culture method and to compare the obtained absorbance values statistically. Cytotoxic effects of four different irrigation solutions were used in our study to evaluate the. These solutions were MTAD, SmearClear, EDTA, and NaOCl. 12 samples from each solution were taken and put into sterile cylindirical polyethelene containers in aseptic conditions as per the instructions by the producer. The discs prepared for each tested chemical were placed in 24 chamber cell culture plates and 1 ml culture medium, DMEM (Dulbecco's Modified Eagle Medium), was added on each of them. The obtained samples were collected after 24. and 48. hours and spectrophotometric measurement for cell vitality was conducted. Two different methods were used for the evaluation of the cytotoxicities. The first method was cell vitality test with MTT method, and the second was cell vitality test with protein identfying method. The results we obtained in MTT test with changing absorbance showed that the difference between the control group and the test materials was statistically significant. (p<0,001). When experiment solutions were evaluated in terms of absorbent level distribution among the test materials, the least cytotoxic material was MTAD, while EDTA was found out to be the material that produced the most cytotoxic reactions. However, the absorbent level distribution difference among the materials wasn't statistically significant. At the end of 48. hours, MTAD was the least cytotoxic material again among the test materials and NaOCl was found out to be the most cytotoxic material which is different from the results of 24. hours time interval. Only Smear Clear group showed significant difference of cytotoxicity degree between 24 and 48 hour intervals..In protein identifying method, the difference between control group and MTAD, Smear Clear,NaOCl and EDTA was statistically significant for both time periods (p<0.001). While MTAD was the least cytotoxic among the test materials in the group at the end of the 24. and 48. hours , EDTA was found out to be the most cytotoxic material within 24. hours and NaOCl was found out to be the most cytotoxic material at the end of 48 hours in terms of cytotoxicity (p<0,001). Besides Smear Clear group, NaOCl and MTAD group showed significant difference of cytotoxicity degree between 24. and 48. hours intervals.