Lamivudin tedavisi sırasında gelişen ve adefovir dipivoksil tedavisine çapraz direnç gösteren yeni bir mutasyon paterni
Tezin Türü: Yüksek Lisans
Tezin Yürütüldüğü Kurum: Ankara Üniversitesi, Sağlık Bilimleri Enstitüsü, TEMEL HEPATOLOJİ ANABİLİM DALI, Türkiye
Tezin Onay Tarihi: 2005
Tezin Dili: Türkçe
Öğrenci: ERSİN KARATAYLI
Danışman: ABDURRAHMAN MİTHAT BOZDAYI
Özet:47 ÖZET Lamivudin Tedavisi Sırasında Gelişen Ve Adefovir Dipivoxil Tedavisine Çapraz Direnç Gösteren Yeni Bir Mutasyon Paterni Yeni nükleozid analoglarının geliştirilmesi ile ilaç direncinin kontrolü ve önlenmesi HBV enfeksiyonlarının antiviral tedavisinde en önemli sorunlardan biri olarak ortaya çıkmıştır. Çalışmamızın amacı, kronik B hepatitli bir hastada, lamivudin tedavisi altında gelişen ve adefovir dipivoksil tedavisine çapraz direnç göstererek primer yanıtsızlık oluşturduğu gösterilen bir mutasyon paterninin moleküler karakterizasyonunu yapmaktır. HBeAg pozitif/Anti-HBe negatif, 44 yaşındaki erkek hastanın, 1999 yılında yapılan karaciğer biyopsisinde HAI skoru 6 olarak saptanmış ve 9 ay, 9MU/TIW I FN tedavisi almış, yanıtsız olduğundan, lamivudin 100 mg/g monoterapi ile devam edilmiştir. Lamivudin tedavisi süresince ALT normal düzeylerine düşmüş ve HBV replikasyonunda inhibisyon sağlanmıştır. Tedavinin 19. ayında genotipik direnç saptanmıştır. Adefovir dipovoxil, 10 mg/g, lamivudin tedavisine antiviral tedavinin 44. ayında eklenmiştir. Adefovir, 14 aydan fazla kullanılmasına rağmen ALT normalizasyonu ve HBV viral yükünde herhangi bir azalmaya neden olmamıştır. Bu dönemler içinde elde olan serum örneklerinden HBV genomu PZR ile çoğaltılmış ve Topo XL vektörüne klonlanarak her bir örnekten 8-10 klonun DNA dizi analizi yapılmıştır. Ayrıca saptanan mutasyon paternini taşıyan HBV tüm genomu in vitro çalışmalarının yapılabilmesi amacıyla pHY106 ekspresyon vektörüne klonlanmıştır. Yapılan DNA Dizi Analizi sonuçları A181S+M204I mutasyon paterninin lamivudin tedavisi sırasında geliştiğini ve aynı paternin adefovir tedavisinde de devam ettiğini göstermiştir. A181S+M204I mutasyon paternini taşıyan HBV tüm genomunun pHY106 ekspresyon vektörlerine klonlandıktan sonra klonlama ürünlerinin replikasyon kompetent oldukları, Huh7 hücrelerinde HBV replikasyonunun analizinin RT-PZR sonuçları ile gösterilmiştir. Sonuçlarımız, lamivudin tedavisi altında gelişen A181S+M204I mutasyon paterninin adefovir tedavisine çapraz direnç göstererek primer yanıtsızlık oluşturduğunu dünyada ilk kez göstermiştir. Bu mutasyon paternini taşıyan HBV tüm genomunun, pHY106 ekspresyon vektörü içerisine klonlanması, gelecek in vitro fenotipleme çalışmalarında kullanılması açısından oldukça önemlidir. Anahtar sözcükler: Hepatit B virüsü, anti-viral ilaçlar, lamivudin, adefovir dipivoksil, klonlama