Bir multipl skleroz biyobelirteci olan anti-miyelin temel protein için polietilen glikol fonksiyonel karbon nanotüp temelli immünosensörün geliştirilmesi


Tezin Yürütüldüğü Kurum: Ankara Üniversitesi, Fen Bilimleri Enstitüsü, Türkiye

Tezin Onay Tarihi: 2016

Tezin Dili: Türkçe

Öğrenci: Mustafa ÖZKAN

Danışman: EMEL EMREGÜL

Özet:

Bu tez çalışmasında MS’e neden olan oto-antikorlardan Anti-Miyelin Temel Proteini’nin hızlı, ekonomik ve güvenilir olarak tayin edecek ve MS teşhisinde manyetik rezonans görüntülerine destek olacak klinik veriler sunabilecek karbon nanotüp temelli Miyelin Temel Proteini (MBP) immünosensörünün geliştirilmiştir. Bu amaçla tez kapsamında karbon nanotüpler polietilen glikol ile fonksiyonellenip, taşıyıcı materyal olarak jelatin ile kaplanmış karbon baskı devre elektrotlara immobilize edilmiş, bu platform üzerine MBP immobilizasyonu gerçekleştirilerek immünosensör sistemi tamamlanmıştır. İmmünosensörün optimizasyon ve karakterizasyonu elektrokimyasal impedans spektroskopisi (EIS), dönüşümlü voltametri (CV) ve Taramalı Elektron Mikroskopisi (SEM) ile denetlenmiştir. Karbon nanotüp fonskiyonelleme işlemi Fourier Transform Infrared Spektroskopisi (FTIR) ve Taramalı Elektron Mikroskopisi ile karakterize edilmiştir. EIS, CV ve SEM ile yapılan karakterizasyon araştırmaları, biyoduyarlı molekülün (MBP) yüzeye etkin şekilde immobilize edildiğini ortaya koymuştur. Optiumum şartların belirlenmesinin ardından kalibrasyon grafikleri çizilmiştir. Kalibrasyon çalışmaları immünosensörün düşük tayin limitine ve geniş aralıklarda doğrusallığa sahip olduğunu göstermiştir. Geliştirilen immünosensöre ait kalibrasyon grafiklerinin çizilmesinden sonra gerçek örneklere uygulanabilirliği araştırılmıştır. Çalışma tamamlandığında insan kanından bir MS biyobelirteci olan Anti-MBP’nin doğru ve hızlı tayini için bir immünosensör önerilmiştir.AbstractIn this thesis, a carbon nanotube based Myelin Basic Protein immunosensor which isable to determine Anti-Myelin Basic Protein, a auto-antibody causes MultipleSclerosis, rapidly, cost effectively and reliably and provide clinical data in order tosupports magnetic resonance imaging, was developed. For this purpose, carbonnanotubes were functionalized with polyethylene glycol and immobilized ontogelatin modified screen printed electrodes and immunosensor system werecompleted by immobilizing Myelin Basic Protein on this platform. Optimization andcharacterization of immunosensor were inspected with electrochemical impedancespectroscopy (EIS), cyclic voltammetry (CV) and scanning electron microscopy(SEM). Carbon nanotube functionalization process were characterized with Fourier-Transform Infrared Spectroscopy (FTIR) and scanning electron microscopy.Characterization investigations which were carried out with EIS, CV and SEM showthat bioreceptor molecule (MBP) was successfully immobilized onto surface.Calibration curves were obtained following defining of optimum conditions.Calibration studies proved that immunosensor has a low limit of detection and wideranges of linearity. Caibration curves were obtained and applicability ofimmunosensor to real samples were examined. By completion of studies, animmunosensor which is able to determine of a MS biomarker, Anti-MBP, rapidlyand sensitive, was proposed.