Akademik Veri Yönetim Sistemi
Tezin Türü: Doktora
Tezin Yürütüldüğü Kurum: Ankara Üniversitesi, Sağlık Bilimleri Enstitüsü, Türkiye
Tezin Onay Tarihi: 2010
Tezin Dili: Türkçe
Öğrenci: PINAR AKPINAR OKTAR
Danışman: ALP CAN
Özet:Çalışmamızın temel amacı nükleostemin gibi erişkin kök hücrelerin farklılaşmasındarol aldığı düşünülen ve bölünen hücrelerde belirteç olarak kabul edilen bir diziçekirdek ve sitoplazma proteinlerin, ifadelenme profilleri ve hücresel dağılımlarınınbelirlenmesidir. Çalışma sırasında nükleosteminin insan kökenli mezenkimal kökhücrelerdeki ifadelenmesine ek olarak farklanma ve diğer hücre iskelet proteinleri veçekirdek proteinleri ile ilişkisi irdelenmiştir.Çalışmamızda incelediğimiz çekirdek proteinlerinden biri olan nükleostemininkök hücrelerdeki ifadelenmesinin belirlenmesi ve bu proteinin diğer hücre iskeletiproteinleriyle çekirdek proteinleri arasındaki ilişkisi konfokal mikroskopiyleincelenmiştir. Nükleosteminin farklanmış kök hücrelerdeki ifadelenme ise konfokalve qRT-PCR yöntemi ile araştırılmıştır. Akım sitometri yöntemiyle de İGBSMKH‟lerde puluripotent kök hücre belirteçlerinin ve bazı mezenkimal kök hücrebelirteçlerinin varlığı araştırılmıştır.Elde edilen en önemli bulgulardan biri nükleosteminin hücrelerin interfazçekirdekleri ile mitozun değişik evrelerinde çok farklı yerleşimler göstermişolmasıdır. Nükleostemin özellikle mitoz hücre bölünmesinin profaz, metafaz veanafaz evrelerinde, kromozomların kollarının etrafını dolaşarak, yamalı bir görünümverecek şekilde sardığı ve kromozom kolları arasındaki boşlukları doldurduğugözlenmiştir. Nükleosteminin kromozom kolları arasındaki dağılımıyla, fizikselolarak ayrılan kromozomların korunmasını sağladığı, mutasyon oluşumunuengellediği düşünülmektedir. Bu bulgu daha önce hiç bir çalışmada gösterilmemiştirAyrıca α- ve β-tubülinler ve NuMA ile ilişkisinin belirlenmesi, nükleostemininbölünme sırasında hücre iskeletinin korunması, mikrotübülüs mekiğinindüzenlenmesi gibi önemli görevleri olabileceği fikrini de akla getirmiştirDeneysel bulgularımızın özellikle nükleosteminin hücre iskeletinde,kromozomların stabilizasyonunda ve hücre farklanmasındaki rolünün açıklanmasınaışık tutacağı ve katkıda bulunacağı inancındayız.AbstractThe main purpose of our study is determining the expression profiles and celldiffusion of series of nuclear and cytoplasm proteins which is thought to take a role inthe differentiation of adult stem cells like nucleostamin and conceded to be a markerin divided cells. Determining the expression of human driven meshencymal stem cell,differentiation and examination of the relation of cell structure proteins and nuclearproteins.The determination of expression of nucleostemin, which is one of the nuclearproteins that is examined in our study, in stem cell and the relation of this protein andcell structure proteins and nuclear proteins are examined in confocal microscopy.Expression of nucleostemin in differentiated stem cells is investigated with confocaland qRT-PCR method. The existance of pluripotent stem cell markers on HUCSMSCand the existance of some meshencymal stem cell markers are examined withflow cytometry method.One of the most important findings in this phase is different localization ofnucleostamin in nucleuses on interphase phase of cells and different phases ofmitosis. Nucleostamin, especially prophase, methapase and anaphase phases ofmitosis cell division, circles around chromosome arms and gives out a patchyappearance. It seems to fill the space between chromosome arms. It is thought thatnucleostemin helps the protection of physically detached chromosomes and preventsthe formation of mutations by distribution among chromosome arms. Thisexperimental result has never been showed before in previous studies. Besidesnucleostemin is thought to have some important functions on designating the relationof α- and β-tubulins and NuMa, preservation of cell structure during division of celland ordering microtubulus spindle.We have a confidence that our experimental results make contribution instabilization of chromosomes on cell structure and representation of the role on celldifferentation of nucleostamin especially.