L. lactis subsp. lactis MBLL9 suşunda endüstriyel öneme sahip özelliklerin genetik determinantları
Tezin Türü: Yüksek Lisans
Tezin Yürütüldüğü Kurum: Ankara Üniversitesi, Biyoteknoloji Enstitüsü, Biyoteknoloji Anabilim Dalı, Türkiye
Tezin Onay Tarihi: 2008
Tezin Dili: Türkçe
Öğrenci: NEFİSE AKKOÇ
Danışman: MUSTAFA AKÇELİK
Açık Arşiv Koleksiyonu: AVESİS Açık Erişim Koleksiyonu
Özet:Bu çalışmada, L. lactis subsp. lactis MBLL9 suşunda laktoz fermentasyonu, proteolitik aktivite, bakteriyosin üretimi ve faj dirençlilik özelliklerinin genetik doğası araştırıldı. Klasik mutasyon testleri, 21.5 kb büyüklükteki plazmidin laktoz fermentasyonu ve proteolitik aktivite özelliklerini kodladığına işaret etti. MBLL9 suşunun 21.5 kb plazmidi giderilmiş mutantında, M17 ortamında tanımlanan maksimum spesifik gelişme oranı ve populasyon yoğunluğundaki düşmeler, mutasyon bulgularını doğruladı. MBLL9 suşunun ürettiği bakteriyosinin tanısında, kimyasal ve fiziksel analizler yanında polimeraz zincir reaksiyonu (PZR) kullanıldı. Çalışmalar sonucunda, bu suşun ürettiği bakteriyosinin laktisin 481 olduğu belirlendi. Plazmid giderme, PZR ve DNA dizi analizi verileri, laktisin 481 operonunun 22.4 kb plazmid üzerinde bulunduğunu kanıtladı. Faj-konakçı biyodenemeleri ve mutasyonel analizler, MBLL9 suşundaki faj dirençlilik sisteminin, adsorbsiyonun engellenmesi tipte ve kromozomal DNA kökenli olduğunu gösterdi. L. lactis subsp. lactis MBLL9 suşundaki konjugal aktarım yeteneği içeren tek plazmidin (22.4 kb laktisin 481 plazmidi) aktarım sıklığı, verici hücre başına 4.6x10-4 oranında gerçekleştirildi. Süt ortamında laktoz fermentasyonu/proteolitik aktivite ve laktisin 481 üretiminden sorumlu plazmidlerin stabilitesi, sırasıyla % 98 ve % 96, konjugant suş MN30'da laktisin 481 üretiminden sorumlu plazmidin stabilitesi ise % 100 olarak saptandı.