Büyüme faktörlerini sıralı salan kitosan doku iskelelerinin üretimi ve kemik doku mühendisliği uygulamaları


Tezin Türü: Doktora

Tezin Yürütüldüğü Kurum: Ankara Üniversitesi, Fen Bilimleri Enstitüsü, KİMYA MÜHENDİSLİĞİ ANABİLİM DALI, Türkiye

Tezin Onay Tarihi: 2014

Tezin Dili: Türkçe

Öğrenci: EDA GÖZ

Danışman: AYŞE KARAKEÇİLİ

Açık Arşiv Koleksiyonu: AVESİS Açık Erişim Koleksiyonu

Özet:

Sunulan tez çalışması kapsamında kemik dokunun doğal iyileşme sürecinde varlığı bilinen ve hücresel fonksiyonlar üzerinde çoğalma ve farklılaşma gibi değişik etkilere sahip olan iki farklı büyüme faktörünün, kontrollü ve sıralı salımını gerçekleştirmek için bir sistem üretilmiş ve kemik doku mühendisliğinde kullanım potansiyeli araştırılmıştır. Bu amaçla tez kapsamındaki çalışmaların ilk aşamasında büyüme faktörlerinin yükleneceği poli(3-hidroksibutirat-ko-3-hidroksivalerat) (PHBV) ve jelatin partiküllerin sentez koşullarının belirlenmesi ve karakterizasyonu gerçekleştirilmiştir. Emülsiyon difüzyonu yöntemi ile hazırlanan PHBV partiküllerin karakterizasyon çalışmaları kapsamında SEM, TEM, DSC, FTIR, parçacık boyut dağılımı ve degradasyon çalışmaları yürütülmüştür. Diğer taraftan su-yağ emülsiyonu ile hazırlanan jelatin partiküllerin karakterizasyonunda SEM, FTIR ve su tutma kapasitesi deneyleri gerçekleştirilmiştir. Hücre üremesi üzerinde etkili olduğu bilinen PDGF-BB jelatin partiküllere emdirilerek, hücre farklılaşması üzerinde etkili olduğu bilinen BMP-6 ise PHBV partiküllere ikili emülsiyon yöntemi ile yüklenmiştir. Tez çalışmasının ikinci aşamasında üç boyutlu yapıda olan kitosan doku iskeleleri dondurarak-kurutma yöntemi ile hazırlanmış ve karakterizasyon çalışmaları yapılmıştır. Sonrasında BMP-6 içeren PHBV partiküller ile PDGF-BB içeren jelatin partiküller doku iskelesine yüklenmiş ve salım davranışları ELISA testi ile analiz edilmiştir. Tez çalışmasının son bölümünde BMP-6 ve PDGF-BB yüklü kitosan doku iskeleleri ile MC3T3-E1 preosteoblast hücre hattının kullanıldığı hücre kültür çalışmaları gerçekleştirilmiş ve büyüme faktörlerinin hücre göçü ve üremesi ile farklılaşması üzerine olan etkileri araştırılmıştır. Kitosan doku iskeleleri üzerindeki hücre yapışması, üremesi ve morfolojisi MTT ve SEM analizleri ile hücre farklılaşması ise von Kossa ve RT-PCR analizleri ile belirlenmiştir. PDGF-BB ve BMP-6'nın birlikte yüklendiği ve farklı hızlarda salındığı doku iskelelerinin büyüme faktörlerinin tek tek kullanıldığı doku iskelelerine göre hücre üremesi ve farklılaşmasında avantaj sağladığı sonucuna varılmıştır.