Brodifacoum'un sıçan dalağı üzerine histokimyasal etkisi


Tezin Türü: Yüksek Lisans

Tezin Yürütüldüğü Kurum: Ankara Üniversitesi, Fen Bilimleri Enstitüsü, Türkiye

Tezin Onay Tarihi: 2016

Tezin Dili: Türkçe

Öğrenci: BURCU BAYRAMLI

Danışman: NURSEL GÜL

Özet:

Bu çalışmada kemiricilere karşı kimyasal mücadelede kullanılan Brodifacoum’un dalaküzerine hisyokimyasal etkileri CD4 ve CD8 histokimyasal boyama yöntemi ile ışıkmikroskobunda araştırıldı. Deneylerde sıçanlar beş gruba ayrıldı (n:6 birey): kontrolgrubu, 24 saat, 72 saat, 14 gün, 30 gün brodifacoum uygulamalı grubu.Brodifacoum’un 0,2 mg’lık tek dozu Dimetil sülfoksitte (DMSO) çözdürülerek, erginerkek sıçanlara oral yoldan bir kez verildi. Deney grubundaki sıçanlardan uygulamadan24 saat,72 saat, 14 gün ve 1 ay sonra ve kontrol grubundaki sıçanlardan 14 gün sonraeter anestezi ile dalakları alındı. Dokular tespit edildi, dehidre edildi ve parafinegömüldü. Parafin bloklardan 5 mikron kalınlığında kesitler alınıp, ışık mikroskobundahistokimyasal yöntemlerle incelendi.Yapılan ışık mikroskobu çalışmasında kontrol grubu sıçan dalağındaki kapsül, beyazpulp ve kırmızı pulp bölgelerinin normal yapıda olduğu ve doğal yapısındaki gibiprimer ve sekonder foliküllerin (germinal merkez) az sayıda olduğu ayrıca CD4 ve CD8lenfositlerin normal yapılarına uygun olarak yuvarlak oldukları gözlendi. 24 saatbrodifaoum uygulanmış sıçan dalakların da CD4 ve CD8 hücrelerinde bozulmalarınbaşladığı ve germinal merkezlerin çaplarında büyüme olduğu gözlendi. Zaman artışınabağlı olarak (72 saat ve 14 gün) primer foliküller artarken, germinal merkezlerinçaplarında artış ve doku kayıpları tespit edildi. Bunun yanı sıra brodifacoumuygulamasından 30 gün sonra sıçanlarda alınan dalaklarda CD4:CD8 oranının kontrolgrubuna yaklaştığı, hücre şekillerinde düzelme iyileşmenin etkisi olarak rapor edildi.Yapılan bu çalışmayla brodifacoum’un sıçan dalağında immünohistokimyasal olarakanormalliklere yol açtığı tespit edilmiştir.AbstractIn this study, histochemical effects of Brodifacoum, an anticoagulant used againstrodents, on spleen are examined under light microscope by using CD4 and CD8histochemical staining method. On the experiments rats were divided into five groups(n:6 individual): control group, 24 hours, 72 hours, 14 days and 30 days Brodifacoumapplied groups. Single dose of 0.2 mg Brodifacoum was dissolved in DimethylSulfoxide (DMSO) was given orally to mature male rats. Spleen samples were collectedunder ether anaesthesia after 24 hours, 72 hours, 14 days and 1 month from the rats inthe experimental groups and after 14 days from the rats in the control group. Tissueswere fixed, dehydrated and embedded into paraffin. Sections with 5 micron thick weretaken from paraffin blocks and examined under light microscope by using histochemicalmethods.In this light microscope study, it was observed that capsule, white pulp and red pulpzones in the rat spleen were constructed normally and as their natural structure primaryand secondary follicles (germinal center) they were few in number and CD4 and CD8lymphocytes were spherically structured. In the 24 hours spleens of the rats, thediameters of germinal centers were expanded and deterioration of the structure of CD4and CD8 cells was observed. Related to the increase in time (72 hours and 14 days) itwas determined that primary follicles increased in number and the diameters ofgerminal centers expanded. In addition to this, after30 days, the rate of CD4:CD8 of thebrodifacoum apllied rat spleens was approximate to the rate of the control group and theimprovement of the structures of the cells were reported as an effect of regeneration.With this presented study, it was identified that brodifacoum causedimmunohistochemically abnormalities on rat spleen.