Mercimek (Lens culinaris Medik)'te doku kültürü çalışmaları ve Agrobacterium tumefaciens aracılığıyla gen aktarımı
Tezin Türü: Doktora
Tezin Yürütüldüğü Kurum: Ankara Üniversitesi, Fen Bilimleri Enstitüsü, TARLA BİTKİLERİ ANABİLİM DALI, Türkiye
Tezin Onay Tarihi: 2001
Tezin Dili: Türkçe
Öğrenci: KHALİD MAHMOOD KHAWAR BHATTİ
Danışman: SEBAHATTİN ÖZCAN
Açık Arşiv Koleksiyonu: AVESİS Açık Erişim Koleksiyonu
Özet:Mercimeğe ait 21 genotipin kotiledon boğum eksplantlarından 0.05 mg/1 TDZ içeren MS besin ortamında yüksek oranda adventif sürgün rejenerasyonu elde edilmiştir. Daha sonra en yüksek adventif sürgün elde edilen 7 genotipe (Pul 11, Akm 261, Dİ 62, Akra 49, Kışlık 21, Akm S6S ve Akm 362) gen aktanım yapılmıştır. Bu hatların kotiledon boğum eksplantlarının GV 2260 (pGV 2260) :: p35GUS INT, EHA 105 (pTiBo542) :: p35GUS INT ve LBA 4404(pAL 4404) :: pRGGbar bakteri hatlarıyla inokulasyonu sonucunda yüksek oranlarda transgenik sürgünler elde edilmiş, ancak bu sürgünler daha sonra IBA'lı ortamda köklendirilememiştir. Köklendirme problemini aşmak için, GUS pozitif sürgünler kesilerek önceden in vitro tohumdan geliştirilmiş Kayı 91 çeşidinin fidecikleri Üzerine aşılanmıştır. Değişik genotiplerden 16 aşı yapılmış olup, bu aşılardan 11 tanesi tutarak gelişme göstermiştir. Aşılanan bu bitkicikler daha sonra saksılara aktarılmış ve iklim dolaplarında dış şartlara alıştırılmaya çalışılmıştır. İklim dolabında gelişen bu bitkiciklerden yaprak örnekleri alınarak PCR analizi yapılmıştır. PCR analizine göre 8 bitkinin transgenik olduğu belirlenmiştir. Ancak, transgenik bitkiler daha sonra iklim dolabında gelişmeyerek ölmüşlerdir. Anahtar kelimeler: Lens culinaris Medik, adventif sürgün rejenerasyonu, Agrobacterium tumefaciens, köklendirme, in vitro aşılama