Behçet hastaları ve sağlıklı bireylerde üroepitel hücrelerin Streptococcus Pyogenes ve E. Coli'ye karşı bakterisidal etkisinin araştırılması


Tezin Türü: Tıpta Uzmanlık

Tezin Yürütüldüğü Kurum: Ankara Üniversitesi, Tıp Fakültesi, Türkiye

Tezin Onay Tarihi: 2010

Tezin Dili: Türkçe

Öğrenci: EVRİM AKSU

Danışman: AYDIN KARAARSLAN

Özet:

Behçet hastalığı (BH) tekrarlayıcı oral aftlar, genital ülserler, deri lezyonları ve üveyit ile birlikte vasküler, nörolojik ve gastrointestinal bulgular ile karakterize ve sistemik inflamatuar bir hastalıktır. Hastalığın etyolojisi bilinmemesine rağmen, immunolojik bozukluklar üzerinde durulmakta, gelişiminden genetik, çevresel, virolojik, bakteriyel ve immunolojik faktörler sorumlu tutulmaktadır. Mukozal immun sistemde epitel hücresi, özgül olmayan immun yanıttan kazanılmış immun yanıta geçişte ve immun hemostazın regülasyon veya tolerans yönünde belirlenmesinde kavşak noktası oluşturmakta; antijene, antijenin yapısı, miktarı ve sunum şekline göre nasıl bir yanıt oluşturulacağını belirlemektedir. Çalışmamızda, Behçet hastalarında ve sağlıklı bireylerde üroepitelyal hücrelerin Streptococcus pyogenes ve Esherichia coli'ye karşı bakterisidal etkisinin olup olmadığı araştırılması amaçlanmıştır. Behçet hastalarında oral epitel hücresinin azalmış bakterisidal etkisi gösterilmiştir. Çeşitli hasta gruplarında, epitel hücresinin enfeksiyona yatkınlıktaki etkisinin incelenmesiyle, hastalığın patogenezine katkısının olacağını düşünmekteyiz. Efektör hücre olarak kullanılan idrar epitel hücresi (İEH) ve hedef hücre olarak kullanılan S. pyogenes ATCC 49619 ve E. coli O75 suşları 1/1 E/H oranında plaklarda karşılaştırılmıştır. 1 saatlik inkübasyonun ardından her bir kuyucuk içeriği toplanmış ve S. pyogenes kanlı agara, E. coli adi agar besiyerine ekilmiştir. 37ºC'de 1 gecelik inkübasyondan sonra plaklarda meydana gelen koloni oluşturan birimler sayılmış ve bakterisidal etki yüzdesi hesaplanmıştır. Çalışmaların istatistiksel değerlendirmesi t test ve Dixon testi ile yapılmıştır. Çalışmalar sonucunda İEH'nin 1. saatte Behçet hastalarında S. pyogenes'e karşı ortalama %31.6, E. coli'ye karşı %23.3, sağlıklı kontrollerde ise S.pyogenes'e karşı %46.8, E.coli'ye karşı %60 bakterisidal etki gösterdiği tesbit edilmiştir. Behçet hastaları ve sağlıklı kontroller arasında S. pyogenes'e karşı antibakteriyel etkinlik açısından istatistiksel olarak anlamlı bir fark saptanmamıştır (p>0.001). Bunun yanında, Behçet hastalarında E. coli'ye karşı bakterisidal etkinin, sağlıklı kontrollere göre anlamlı derecede düşük olduğu saptanmıştır (p<0.001). Behçet hasta grubunda ve sağlıklı kontrol 53 grubunda S. pyogenes ve E. coli arasında bakterisidal etki açısından istatistiksel olarak anlamlı bir fark saptanmamıştır (p>0.001). Bizim çalışmamızda, Behçet hastalarının İEH'nin E. coli'ye karşı bakterisidal etkisinin sağlıklı bireylere göre anlamlı olarak daha düşük olduğu saptanmıştır. Bu durum Behçet hastalarında, üriner sistem enfeksiyonlarının en sık etkeni olan E. coli'ye karşı konak savunmalarında koruyucu immun mekanizmaların eksikliğinin bir sonucu olabilir. abstractBehcet?s disease (BD) is a systemic inflamatuar disorder, characterized by recurrent oral apthous ulcers, genital ulcers, skin lesions and uveitis with the other manifestasions, including vasculer, gastrointestinal and neurological involvement. Although ethiology of the disease is unknown, viral and bacteriologic agents, genetic, environmental and immunologic factors are responsible for ethiology. Epithelial cells have critical role at designate immun homeostasis whether as immun regulation or tolerance and according to antigen structure, dose and form of the presentation way response type will be a determinant in the mucosal immun system. The aim of the present study is to investigate whether bactericidal effect of the epithelial cells against S. pyogenes and E. coli in Behcet?s disease and healty controls. In the previous studies, bactericidal effects of vagen, intestine, oral and urogenital epithelial cells and decreased bactericidal effect of the oral epithelial cells in Behcet?s disease have been found. We suggest that analyzing the effect of epithelial cells on susceptibility to infection in several disease groups; thus the contribution to pathogenesis is expected. The investigation with urinary epithelial cells has been chosen due to the absence of the studies in this topic, and getting epithelial cells from urine samples with non-invasive methods. If there is any significant bactericidal effect of uroepithelial cells in between Behçet and healty conrols, findings of this study would probably lead further studies, which could explain the pathogenesis of Behçet?s disease. Before the experiment, urine epithelial cells (used for effector cell) and S. pyogenes ATCC 49619 and E. coli O75 (used for target cell) strains were prepared, and the cells were stimulated with bacteria in plates with an effector cell/target cell ratio of 1/1. At the end of 1 hour incubation, well contents were collected from each wells and were inaculated to blood agar for S. pyogenes and agar plates for E. coli. Following overnight incubation at 37ºC colony forming units were enumarated and bacterisidal effect were calculated. Final data were controlled with Dixon test, and analyzed with t test. According to the results, the bacterisidal effects against S. pyogenes and E. coli in Behcet?s disease patients are 31,6%, and 23,3%, respectively. These percentages are 46.8% and 60% for healty controls. 55 In terms of bactericidal effect against S. pyogenes, there was no statistically significant difference between Behcet?s disease patients and healty controls (p>0.001). Besides, the bactericidal effects against E. coli was significantly lower in Behcet?s disease patients than that healty controls (p<0.001). Between S. pyogenes and E. coli, there was no significantly difference in Behcet?s disease patients and healty control groups (p>0.001). In our study, the bactericidal effect of uroepithelial cell against E. coli is found significantly lower in Behcet?s disease patients than healty controls. This is probably due to the result of lack of productive immun mechanisms in host defence against E. coli, the most frequently agent of urinary tract infections in Behcet?s disease patients.