İzole edilmiş sıçan kondrositlerinin ve polimer iskeletlerin kullanımıyla kıkırdak dokusu geliştirilmesi
Tezin Türü: Yüksek Lisans
Tezin Yürütüldüğü Kurum: Ankara Üniversitesi, Fen Bilimleri Enstitüsü, Kimya, Türkiye
Tezin Onay Tarihi: 2005
Tezin Dili: Türkçe
Öğrenci: NURAY EMİN
Danışman: Yaşar Murat Elçin
Özet:ÖZET Yüksek Lisans Tezi İZOLE EDİLMİŞ SIÇAN KONDROSİTLERİNİN VE POLİMER İSKELETLERİN KULLANIMIYLA KIKIRDAK DOKUSU GELİŞTİRİLMESİ Nuray EMİN Ankara Üniversitesi Fen Bilimleri Enstitüsü Biyokimya Anabilim Dalı Danışman: Prof. Dr. Y. Murat ELÇİN Wistar sıçanların artiküler kıkırdağından aseptik koşullarda enzimatik olarak izole edilen kondrositler, üç boyutlu statik ve dinamik kültürler ile paralel deney olarak tek tabaka kültürlerde çoğaltıldı. Üç boyutlu ortamı sağlamak amacıyla Poli(L-Laktik-ko-Glikolik)asit (PLGA) iskeletler kullanıldı. İzole edilmiş hücreler, içerisinde önceden kültür sıvı ile ıslatılmış iskelet içeren biyoreaktöre konuldu. Statik üç- boyutlu ve tek tabaka (iki-boyutlu) kültür şartlan kontrol olarak yürütüldü. Kondrositlerin, in vitro şartlarda dediferansiye olmadan çoğaltılmalarını sağlamak amacıyla hazırlanan kondrojenik vasat, 10% FCS (fetal sığır serumu), esansiyel-olmayan amino asit çözeltisi, L-glutamin, askorbik asit, antibiyotik-antimitotik çözeltisi ve TGF-p içeren DMEM'den oluşturuldu. Kondrositlerin, TGF-P içeren kondrojenik vasatda farklılaşmadan hızla çoğalabildikleri gözlendi. İmmünhistokimya çalışmaları, kondrositlerin üç-boyutlu statik kültürlerde düşük miktarda kollajen tip- 1, daha yüksek düzeyde kollajen tip-2 sentezi sentezi yapabildiklerini gösterdi. Buna karşın, kontrol tek tabaka kültürlerde kollajen tip-2 sentezinin yanısıra, daha yüksek düzeyde kollajen rip-1 sentezinin gerçekleştiği gösterildi. Çalışmalar, kondrosit ekili PLGA iskeletlerin STLV biyoreaktördeki kültür şartları altında kollajen tip-2 boyaması için en iyi sonucu verdiğini ortaya koydu. Kollajen tip-2 için gözlenen kuvvetli antikor boyaması, hiyalin kıkırdak için spesifikliği ve kültür ortamındaki doğal kıkırdağın rediferansiasyonunu gösterdi. 2004, 75 sayfa ANAHTAR KELİMELER: Kondrosit, kıkırdak, doku mühendisliği, PLGA, üç-boyutlu kültür, TGF-p, biyoreaktör