İzole edilmiş sıçan kondrositleri ve polimerik biyomalzemelerin kullanımıyla kıkırdak doku mühendisliği
Tezin Türü: Yüksek Lisans
Tezin Yürütüldüğü Kurum: Ankara Üniversitesi, Biyoteknoloji Enstitüsü, Biyoteknoloji Anabilim Dalı, Türkiye
Tezin Onay Tarihi: 2006
Tezin Dili: Türkçe
Öğrenci: NURAY EMİN
Danışman: Yaşar Murat Elçin
Açık Arşiv Koleksiyonu: AVESİS Açık Erişim Koleksiyonu
Özet:Wistar sıçanların artiküler kıkırdağından aseptik koşullarda enzimatik olarak izole edilen kondrositler, üç boyutlu statik ve dinamik kültürler ile paralel deney olarak tek tabaka kültürlerde çoğaltıldı. Üç boyutlu ortamı sağlamak amacıyla kalsiyum alginat hidrojeli kullanıldı ve izole edilmiş hücreler kalsiyum alginat jeli içerisine enkapsüle edildikten sonra biyoreaktör içerisine konularak dinamik kültür şartları ile TGF- ß'nın etkisi incelendi. Statik üç-boyutlu ve tek tabaka kültürler ise kontrol olarak yürütüldü. Kondrositlerin, in vitro şartlarda dediferansiye olmadan çoğaltılmalarını sağlamak amacıyla hazırlanan kondrojenik vasat, 20%FCS (fetal sığır serumu), esansiyel olmayan amino asit çözeltisi, L-glutamin, askorbik asit, ITS+ (insülin, transferrin, senoik asit), antibiyotik-antimikotik çözeltisi ve TGF-ß DMEM'den oluşturuldu. Kondrositlerin TGF-ß içeren kondrojenik vasatta farklılaşmadan hızla çoğalabildikleri gözlendi. İmmünhistokimya çalışmaları, kondrositlerin üç-boyutlu statik kültürlerde düşük miktarda kollajen tip-1, daha yüksek düzeyde kollajen tip-2 sentezi yapabildiklerini gösterdi. Buna karşın, kontrol tek tabaka kültürlerde kollajen tip-2 sentezinin yanı sıra, daha yüksek düzeyde kollajen tip-1 sentezinin gerçekleştiği gösterildi. Çalışmalar alginat lif içerisine enkapsüle edilen kondrositlerin, TGF-ß içeren STLV biyoreaktördeki kültür şartları altında kollajen tip-2 ve agrekan boyaması için en iyi sonucu verdiğini ortaya koydu. Kollajen tip-2 için gözlenen kuvvetli antikor boyaması, hiyalin kıkırdak için spesifikliği ve kültür ortamındaki doğal kıkırdağın rediferansiasyonunu gösterdi. ANAHTAR KELİMELER: Kondrosit, kıkırdak, doku mühendisliği, alginat, enkapsülasyon, üç-boyutlu kültür, TGF-ß, biyoreaktör