Yağ asiti bağlanma proteini 4(FABP4/aP2)'e karşı monoklonal antikor geliştirilmesi
Tezin Türü: Doktora
Tezin Yürütüldüğü Kurum: Ankara Üniversitesi, Biyoteknoloji Enstitüsü, Biyoteknoloji Anabilim Dalı, Türkiye
Tezin Onay Tarihi: 2016
Tezin Dili: Türkçe
Öğrenci: AFSAR ABBASI TAGHI DIZAJ
Danışman: ERKAN YILMAZ
Açık Arşiv Koleksiyonu: AVESİS Açık Erişim Koleksiyonu
Özet:Rekombinant proteinler ve antikorlar, Terapötik veya tanısal kullanımı için bir çok konakçı organizmalarda üretilmektedir.Ölümsüz tek tip antikor hücre üretim tekniği, hedef moleküle karşı antikor üreten B lenfositler ve uygun myeloma hücrelerinin füzyonu ile gerçekleştirilmektedir. Kaynaşan melez hücreler(Hibridoma hücreleri), kanser hücreleri gibi hızla çoğalır ve istenen antikorları büyük miktarda üretecektir. FABP4 ve aP2 olarak bilinen yağ asit bağlayıcı protein (FABP), en iyi karakterize edilmiş hücre içi lipit taşıma proteinlerden biridir ve yağ asitlerinin hücre içi ulaşım ve adipoz doku metabolizmasında anahtar rol oynamaktadır. FABP4 glukoz homeostazisini düzenleyen yeni bir adipokindir ve metabolik sendromun çeşitli özellikleri FABP4 tarafından obezite ile bağlantılı olduğu bilinmektedir. Bu çalışmada FABP4 proteininin immunojenik molekülünün rekombinant DNA teknolojisi ile monoklonal antıkor üretimi gerçekleştirilmiştir. Rekombinant His-FABP4 bakteriler içinde ifadelenmiş, afinite saflaştırılması yapılmıştır, bağışıklaştırma için Balb/C dişi fareler bağışıklaştırılmıştır ve enzime bağlı immünosorbent deneyi (ELISA) sistemi ile tarama yapılmıştır. Daha sonra immünize olmuş dalak hücreleri ile miyeloma hücreleri füzyon ederek hibrid hücre oluşturulmuştur. Hibrid hücreleri Balb/C karın boşluğuna enjekte ederek ascites elde edilmiştir. Üretilen monoklonal antikorların aktivitesine Western Blot ve İmmünositokimya yöntemi ile bakılmiştir. Sonuç olarak ürettiğimiz monoklonal antikorların, yağ asit bağlayıcı protein ve lipit metabolizması üzerinde çalışanlar için faydalı olacaktır. Yakın gelecekte, bu antikorların metabolik sendrom için olası bir tedavi yaklaşımı mümkündür. Anahtar Kelimeler: FABP4, Rekombinant Protein, Western Blot, Monoklonal Antikor