İnsan göbek kordonu stroma dokusunun kök hücresi transplantasyonları amacıyla kullanılmak üzere kontrollü dondurulması koşullarının belirlenmesi
Tezin Türü: Yüksek Lisans
Tezin Yürütüldüğü Kurum: Ankara Üniversitesi, Biyoteknoloji Enstitüsü, Biyoteknoloji Anabilim Dalı, Türkiye
Tezin Onay Tarihi: 2009
Tezin Dili: Türkçe
Öğrenci: DENİZ BALCI
Danışman: ALP CAN
Açık Arşiv Koleksiyonu: AVESİS Açık Erişim Koleksiyonu
Özet:Son yıllarda mezankimal kök hücre kaynağı olarak gösterilen göbek kordonu stroması içinde yeralan hücreler, mezankimal seri hücreleri olan adiposit, kondrosit, osteosit ve myosite olanfarklılaşmalarıyla onarımsal tıp uygulamalarında dikkati çekecek kadar ümit verici biçimde ortayakonmuştur. Bazı araştırmalarda işlevsel sinir hücrelerine dek varan farklılaşma gerçekleştirilmiştir.Bunun da ötesinde bu hücrelerin ksenotransplantasyonlarında bile alıcıda immün yanıt oluşmamışve doku reddi ile karşılaşılmamıştır.Bu çalışmada, daha önce kök hücre özelliklerini ayrıntılarıyla gösterdiğimiz bu hücrelerin kaynağıolan dokunun kontrollü bir biçimde dondurulması, ardından çözülerek kök hücrelerin izoleedilmesi ve dondurma öncesinde ve sonrasında hücrelerin yapısal ve işlevsel açıdan incelenmesi vedeğerlendirilmesi amaçlanmıştır.Bilgisayar kontrollü yavaş dondurma sistemi kullanılarak uygun dondurma ortamı ve soğutmaoranı optimize edilmeye çalışılmıştır. Dakikada 1°C ve 0,3°C olacak şekilde ısı düşürülerek ikifarklı soğutma oranı karşılaştırılmıştır. Dondurulan dokulardan ve taze dokudan daha sonra hücreizolasyonu yapılarak hücre morfolojisi, proliferasyon düzeyleri ve sağkalımı değerlendirilmiştir.Dondurma sonrası hücre sağkalımı % 80'in üzerinde bulunmuştur. Dakikada 0,3°C soğutma oranı1°C'ye göre hücre sağkalımını arttırdığı saptanmıştır. Dondurma öncesi ve sonrası hücremorfolojisinde ve mezankimal hücre belirteci olan CD90 (Thy1), vimentin, BMP-4 (bonemorphogenetic protein-4), embriyonik kök hücre belirteçi olan ve bu hücrelerde ifade olduğubilinen Nanog oranlarında, kontraktil proteinler olan aktin, desmin ve ?-düz kas aktini, bir diğerara filaman olan sitokeratin seviyesinde ve yerleşiminde herhangi bir farklılık saptanmamıştır.Bu çalışma sonucunda önemli bir mezankimal kök hücre kaynağı olarak gösterilen göbek kordonudokusunun dakikada 0,3°C ısının düşürülmesiyle bilgisayar kontrollü yavaş dondurulmasıyönteminin güvenilir, etkin bir yöntem olduğu, bu dokunun doğumdan hemen sonra bu yöntemkullanılarak yıllarca saklanabileceği ve gerektiğinde çözülerek kök hücrelerin izole edilebileceğiortaya konmuştur (Bu çalışma Sanayi Bakanlığı STZ 00139.2007/2 nolu projeyle desteklenmiştir).