Rekombinant ROR1 tirozin kinaz antijeninin üretilmesi

---

Tezin Türü: Yüksek Lisans

Tezin Yürütüldüğü Kurum: Ankara Üniversitesi, Biyoteknoloji Enstitüsü, Biyoteknoloji Anabilim Dalı, Türkiye

Tezin Onay Tarihi: 2022

Tezin Dili: Türkçe

Öğrenci: MERVE SAMUR

Danışman: Arzu Atalay

Açık Arşiv Koleksiyonu: AVESİS Açık Erişim Koleksiyonu

Özet:

Reseptör tirozin kinaz benzeri orphan reseptör 1 (ROR1), tirozin kinaz reseptör ailesinin bir üyesi, onkoembriyonik transmembran proteindir. Emriyogenez sırasında normal ifade edilmekte, sağlıklı yetişkin dokularda ifadesi baskılanırken birçok hematolojik ve solid malignitede kanser hücre yüzeyinde aşırı ifade edilmektedir. ROR1 ligand bağlanma alanına Wnt5a endojen ligandın bağlanması ile ROR1 aktive edilir ve aktivasyon artan hücre içi sinyalleşme, tümör büyümesi, hayatta kalması, terapi direnci gibi tümör gelişimi ve ilerlemesine katkı sağlayan hücresel süreçler ile sonuçlanır. ROR1'in kanser gelişimi ve ilerlemesine sağladığı fonksiyonel katkının anlaşılması ROR1'i, yeni immünoterapiler için potansiyel bir hedef haline getirmiştir. Klinik öncesi ve klinik çalışmalarda ROR1'i hedefleyen antikor bazlı immünoterapiler geliştirilmiş ve yenileri geliştirilmeye devam etmektedir. Bu tez çalışmasında ROR1 hücre dışı alanının tamamını kapsayan ve ROR1 hücre dışı alanında bulunan fzd+kringle alanlarını kapsayan iki bölgeye karşı Histidin taq konjuge rekombinant protein üretilmiştir. Bu amaçla ilgili diziler klonlanmış, bakteriyel pET30 ekspresyon sistemi ile ifade ettirilmiş ve Ni-NTA rezin kullanılarak saflaştırılmıştır. Üretilmiş bu iki rekombinant protein, ileride hibridoma teknolojisi ile anti-ROR1 nötralizan monoklonal antikor geliştirilmesi için antijen olarak kullanılacaktır.