Elektrodöndürme tekniğiyle oluşturulan polimer nano-liflerin memeli hücresi etkileşimlerinin incelenmesi


Tezin Türü: Yüksek Lisans

Tezin Yürütüldüğü Kurum: Ankara Üniversitesi, Fen Bilimleri Enstitüsü, Türkiye

Tezin Onay Tarihi: 2007

Tezin Dili: Türkçe

Öğrenci: YAVUZ EMRE ARSLAN

Danışman: Yaşar Murat Elçin

Özet:

Elektrodöndürme tekniğiyle, nanolif-temelli nanotopografik yüzeylere sahip, biyouyumlu ve biyobozunur bir polimer olan poli[(D,L-laktik-ko-glikolik asit) (85:15)] (PLGA) kullanılarak çeşitli boyut ve kalınlıklarda membran iskeleler oluşturulmuştur. Hedefe yönelik olarak elektrodöndürme parametreleri (optimal voltaj, optimal polimer-çözücü-reaktif sistemleri, şırınga-toplayıcı plaka arası mesafe, pompa hızı, şırınga iç çapı, vb.) optimize edilmiştir. Oluşturulan nanotopografik membran iskelelerin nanolif yapıda olup olmadıkları, nanolif boyutu, boyut dağılımı ve benzeri morfolojik özellikleri taramalı elektron mikroskopisiyle, mekanik özellikleri çekme testi ile incelenerek belirlenmiştir. Oluşturulan PLGA nanolif membran iskelelerin, periodontal ligament fibroblastlarının canlılık, tutunma, yayılma, hücre dışı matriks bileşenlerini sentezleme ve farklılaşma gibi temel fizyolojik davranışlarına olan etkileri in vitro hücre kültürü şartlarında incelenmiştir. Bu amaçla, hücre canlılığı ve mitokondriyal dehidrogenaz aktivitesi testleri (MTT), histoloji (H&E ve Alizarin kırmızısı), immünhistokimya (fibroblast yüzey proteini, tip I kollajen, kemik sialoproteini, osteopontin, osteokalsin antikor boyamaları) çalışmaları yapılmıştır.Abstract In this study, scaffolds with various size and thickness were prepapared from a poly[(D,L-lactic-co-glycolic acid) (85:15)] (PLGA) copolymer with biocompatible and biodegradable properties by using the electrospinning technique. To achieve this objective, electrospinning parameters such as applied voltage, concentration of polymer solution, solvent/solvent systems, distance between needle and collecting plate, pump rate and finally needle inner diameter were optimized. Morphological properties of the formed nanotopographic membrane scaffolds such as nanofiber structure, nanofiber size, diameter range, etc. were evaluated by scanning electron microscopy (SEM) and mechanical properties were also determined by tensile tester. The effects of these scaffolds on human periodontal ligament fibroblastic cell adhesion, proliferation, differentiation and synthesis of extracellular matrix were evaluated under cell culture conditions. For this prupose the cell viability and mitochondrial dehidrogenase activity test (MTT), histology (H&E and Alizarin red) and immunohistochemistry (fibroblast surface protein, collagen type I, bone sialoprotein, osteopontin, and osteocalcin antibody stainings) assays were performed.