Mannheimia haemolytica'nın sığır epitel hücreleri üzerindeki apoptotik etkisi
Tez Türü: Yüksek Lisans
Tezin Yürütüldüğü Kurum: Ankara Üniversitesi, Veteriner Fakültesi, Klinik Öncesi Bilimler Bölümü, Türkiye
Tez Danışmanı: Prof. Dr. Serdar Diker
Tezin Onay Tarihi: 2008
Tezin Dili: Türkçe
Özet:
Bu çalışmada, Mannheimia haemolytica'nın sığır epitel hücreleri üzerindeki apoptotik etkisinin belirlenmesi ve sığır mannheimiozisinin patogenezinde epitel hücre apoptozisinin bir rolü olup olmadığının araştırılması amaçlandı. Bunun için apoptotik DNA fargmentasyonunun belirlenmesi amacıyla TUNEL (terminal deoxynucleotidyl transferase nick end labeling) testi, DNA agaroz jel elektroforezi ve Acridine orange-Ethidium Bromide boyama yöntemleri kullanıldıÇalışmada, sığır nazal turbinata epitel hücreleri ve alveolar makrofajlar canlı M. haemolytica kültürü, M. haemolytica'nın lökotoksini (LKT) ve M. haemolytica'nın kaynatılmış tüm hücre sulandırmaları ile 0, 3, 6, ve 18 saat olmak üzere zaman ve doz bağımlı şekilde muamele edilerek incelendi. TUNEL testi tüm zaman ve sulandırmalarda, DNA agaroz jel elektroforezi ve Acridine orange-Ethidium bromide boyama ise 18. saatte tüm sulandırmalarda değerlendirildiDeğerlendirmeye göre TUNEL testinde canlı M. haemolytica kültürü LKT ve kaynatılmış tüm hücre tüm sulandırılmalarda ve tüm zamanlarda turbinata hücrelerinde apoptozisi uyarmadı. DNA agaroz jel elektroforezinde turbinata hücrelerinde DNA merdiveni gözlenmedi ve Acridine orange-Ethidium bromide boyamada da 18. saatte apoptotik hücrelere rastlanmadı. Makrofajlarda ise TUNEL testinde 0. saat dışında tüm zaman ve tüm sulandırmalarda apoptotik değişimlere rastlandı. Bu bulgular, DNA agaroz jel elektroforezi ve Acridine orange-Ethidium bromide boyama ile desteklendiSunulan çalışmada, canlı M. haemolytica kültürü, LKT ve kaynatılmış tüm hücrenin sığır epitel hücrelerinde apoptozisi indükleme potansiyeline sahip olmadığı fakat makrofajlarda apoptozisi indüklediği sonucuna varıldı.