SARS Coronavirus-2 envelope gen bölgesinin baculovirus expresyon sisteminde üretimi ve immun yanıtın kontrolü


Demirbağ Z., Özkul A., Karayel Hacıoğlu İ., Oğuzoğlu T. Ç. (Yürütücü)

TÜBİTAK Projesi, 2021 - 2023

  • Proje Türü: TÜBİTAK Projesi
  • Başlama Tarihi: Mart 2021
  • Bitiş Tarihi: Mart 2023

Proje Özeti

21. yüzyıldan önce Veteriner Hekimliği alanında oldukça tanınan ve insan sağlığı üzerindeki etkileri fazla bilinmeyen Coronaviruslar, SARS, MERS ve bugün de COVID-19 enfeksiyonu ile hiç tahmin edilmeyen bir öneme sahip olmuşlardır. Çin’de Aralık 2019’da başlayan salgın, oldukça yüksek bulaşma hızı ile tüm dünyaya yayılmış, Haziran 2020 itibariyle yaklaşık 10 milyon insanı enfekte ederek 500.000 kişinin ölümüne sebep olmuştur. Ezber bozan bu pandemik enfeksiyon nedeniyle bilim insanları, enfeksiyonla mücadelede kullanılabilecek tedavi seçeneklerini araştırmaya ve bağışıklık sağlayacak aşıların geliştirilmesine odaklanmıştır. Önerilen bu proje kapsamında; COVID-19 enfeksiyonu etkeni SARS-CoV-2’nin zar/zarf (envelope-E) proteininin rekombinant olarak baculovirus ekspresyon sisteminde üretimi ve üretilecek bu proteinin deney hayvanlarında immun yanıtı uyarıp uyarmayacağının araştırılması hedeflenmiştir. Zoonotik Coronaviruslar hakkındaki genel bilgiler, SARS- CoV-1 ve MERS enfeksiyonlarına ait olup, SARS-CoV-2 envelope proteininin immunojenik uyarımı ile ilgili literatür bilgi mevcut olmadığından, önerilen bu proje özgün değere sahiptir. Bu amaçla; bu çalışma için tasarlanacak primerler kullanılarak Türkiye orijinli SARS-CoV-2 saha suşlarından yaklaşık 230 nükleotidden oluşan viral zar/zarf proteini elde edilecek ve transfer plazmide (pVL1393) aktarılacaktır. Baculovirus ekspresyon sisteminde (Bac-to-Bac) rekombinant protein eldesini takiben, ifnar farelerde immunizasyon çalışmaları gerçekleştirilecektir. Böylece üretilecek rekombinant proteinin immun yanıtı uyarıp uyarmadığı test edilmiş olacaktır. Çalışma; Ankara Üniversitesi Veteriner Fakültesi Viroloji Anabilim Dalı BSL3+ laboratuvarı imkanları kullanılarak gerçekleştirilecektir. İmmunojenik yanıt kapasitesinin sorgulanması ile rekombinant proteinlere ait beklenen sonuç elde edildiği taktirde, bu proteinlerin COVID-19 enfeksiyonu ile mücadelede kullanılacak aşı geliştirme ve/veya antikor tanıya yönelik indirekt tanı metodlarına ham madde olma potansiyeli bulunmaktadır.