Rat (Wistar Albino) Testis ve Epididimisinin Postnatal Gelişimi ve Epidermal Büyüme Faktörü Reseptörü ile Ligandlarının Gelişimsel ve Spermatogenik Siklusa Bağlı Ekspresyonları Üzerinde Araştırmalar


Creative Commons License

ERGÜN E. (Yürütücü), ALESAWI Y. A. K.

Yükseköğretim Kurumları Destekli Proje, BAP Doktora, 2023 - 2026

  • Proje Türü: Yükseköğretim Kurumları Destekli Proje
  • Destek Programı: BAP Doktora
  • Başlama Tarihi: Ekim 2023
  • Bitiş Tarihi: Şubat 2026

Proje Özeti

Bu çalışma, farklı postnatal gelişim aşamalarındaki Wistar albino ratların testis ve epididimis dokularının gelişimini inceleyerek, epidermal büyüme faktörü reseptörü EGFR (erbB1, HER1) ile ligandları olan amfiregulin (AREG), epidermal büyüme faktörü (EGF) ve dönüştürücü büyüme faktörü alfa (TGF-α)’nın gelişimsel ve hücreye özgü ekspresyonlarını belirlemeyi amaçlamıştır. Ayrıca, spermatogenik siklus süresince testisteki hücre tiplerinin bu moleküllerle ilişkileri değerlendirilmiştir.

 

Çalışmada, dört farklı postnatal gelişim aşamalarındaki Wistar albino ratın testis ve epididimis dokuları materyal olarak kullanılmıştır. Her biri altı rattan oluşan bu gruplar; neonatal (postnatal 5 günlük, PND5), infantil (postnatal 20 günlük, PND20), geç pubertal (postnatal 50 günlük, PND50) ve olgun (postnatal 70 günlük, PND70) olarak düzenlenmiştir. Testis ve epididimisin histomorfolojik gelişimi Periyodik Asit Schiff (PAS) ve Crossmon’un modifiye üçlü boyama yöntemleriyle, ayrıca yarı ince kesitlere uygulanan Toluidin mavisi boyası ile değerlendirilmiştir. Epididimisin başlangıç segmenti, kaput, korpus ve kauda bölgeleri ile testisin seminifer tubuluslarından alınan kesitlerde EGFR, AREG, EGF ve TGF-α’nın hücresel ve segmental ekspresyonlarındaki yaşa bağlı değişimler, Leydig hücrelerine özgü steroidojenik bir enzim olan CYP11A1’in lokalizasyonu ile birlikte araştırılmıştır. Tüm immunohistokimyasal boyamalar Streptavidin-Biotin Kompleks (Strept-ABC) immunperoksidaz yöntemi ile gerçekleştirilmiş; elde edilen veriler semikantitatif olarak değerlendirilmiştir. İstatistiksel analizler SPSS yazılımı kullanılarak gerçekleştirilmiştir. Semikantitatif immunreaktivite skorları medyan ve aralık (minimum–maksimum) değerleri ile özetlenmiştir. Postnatal dönemler arasındaki farklılıklar Kruskal–Wallis testi ile; aynı yaş grubundaki epididimis segmentleri arasındaki karşılaştırmalar ise Friedman testiyle değerlendirilmiştir.

 

Bulgular, EGFR ve ligandlarının testis ve epididimis dokularında hücre tipi ve gelişim dönemine özgü farklı ekspresyon paternleri sergilediğini göstermiştir. Testiste EGFR özellikle Sertoli, peritubular myoid ve damar düz kas hücrelerinde belirgin, Leydig hücrelerinde ise daha zayıf düzeyde saptanmıştır. EGF ve AREG güçlü şekilde Leydig hücrelerinde eksprese olurken, TGF-α spermatidlerde evreye bağlı pozitiflik göstermiştir. Epididimiste EGFR bazal ve şeffaf hücrelerde belirgin pozitiflik sergilemiş; EGF ve TGF-α yalnızca geç pubertal ve olgun dönemlerde kaput epitelinde ekspresyon göstermiştir. AREG ise epididimis boyunca bazal ve şeffaf hücrelerde pozitiflik göstermesine rağmen gelişim dönemleri arasında istatistiksel olarak anlamlı bir değişiklik sergilememiştir. Testiste EGF, EGFR, TGF-α ve AREG ekspresyonlarının dönemsel karşılaştırmalarında istatistiksel olarak anlamlı bir fark saptanmamıştır. Epididimis dokusunda ise yalnızca kaput segmentinde EGF ve TGF-α ekspresyonu geç pubertal–olgun dönemlerde anlamlı düzeyde artmış (her ikisi için p = 0,043) ve segment karşılaştırmalarında kaputun diğer segmentlere kıyasla daha yüksek pozitiflik gösterdiği belirlenmiştir (her ikisi için p = 0,01). EGFR açısından epididimis segmentleri ve gelişim dönemleri arasında anlamlı bir fark izlenmemiştir.

 

Sonuç olarak, EGF ailesi üyelerinin testis ve epididimis dokularında hücreler arası etkileşimler ile postnatal gelişimle ilgili bölgesel düzenleme süreçlerinde rol oynayabileceği düşünülmektedir. Elde edilen bulgular, özellikle epididimis dokusundaki büyüme faktörlerinin segmental ve hücresel dağılımına ilişkin literatürdeki sınırlı bilgiyi genişletmekte ve EGF ailesi üyelerinin postnatal erkek genital sistemin gelişimindeki olası rollerine ışık tutmaktadır.

 

Anahtar Sözcükler: Epidermal Büyüme Faktörü Reseptörü, Epididimis, Ligandlar, Rat, Testis