Akademik Veri Yönetim Sistemi
Kanat Ö. N., Selmanoğlu G.(Yürütücü)
Yükseköğretim Kurumları Destekli Proje, BAP Y.Lisans, 2015 - 2016
Ülkemizde ağırlıklı olarak tahıl, mısır ve ayçiçeği ilaçlamasında kullanılan bir insektisit olan fipronilin sinir hücrelerinin sayısında ve morfolojisinde değişime neden olduğu bilinmektedir, ancak etki mekanizması aydınlatılmamıştır. Sinir hücrelerinde ortaya çıkan hasar çeşitli fizyolojik bozukluklara neden olabildiği gibi, nörodejeneratif hastalıklarla da ilişkili olabilmektedir. Bu çalışmada insan sinir hücresi hattı olan SH-SY5Y nöroblastom hücre hattında fipronile maruziyet sonucunda oluşabilecek nörotoksik etkiler araştırılmıştır. Bu çalışmada SH-SY5Y hücreleri 24 ve 48 saat süresince 125, 250 ve 500 µM dozlarında fipronile maruz bırakılmıştır. Uygulama sonrasında fipronilin nörotoksisitesi MTT (3-(4 5-dimethyl thiazol-2-yl)-2 5 difenil tetrazolium bromid) testi, laktat dehidrogenaz (LDH) testi, tripan mavisi boyama ve nötral kırmızısı alım testleri ile incelenmiştir. Diğer yandan çalışmada insan SH-SY5Y nöroblastom hücre hattının fipronile maruziyeti sonucu meydana gelebilecek nörodejeneratif değişiklikler, nöronal hücre iskeleti yapısına katılan nörofilamentlerin immünofloresan boyamalarıyla gösterilmiştir. Ayrıca akridin oranj – propidiyum iyodit boyama ve DAPI (4 ', 6-diamidino-2-fenilindol) yöntemleri ile hücre ölüm tipi ya da tipleri belirlenmiştir. Aynı zamanda, nörofilament alt birimlerinin fosforilasyon dereceleri immünositokimyasal yöntemle belirlenerek fipronilin akson canlılığına etkisi araştırılmıştır. Yapılan sitotoksisite testi sonuçlarına göre, fipronil doza ve inkübasyon süresine bağlı olarak SH-SY5Y hücrelerinde sitotoksisitede artışa sebep olmuştur. İmmünfloresan boyama sonuçlarına göre fipronilin artan dozlarına ve inkübasyon süresine bağlı olarak nörofilament miktarında azalma olduğu gösterilmiştir. Hücre ölüm tipini belirlemek için yapılan boyamalara göre ise fipronilin apoptotik hücre ölümüne neden olduğu ortaya konulmuştur.